论文部分内容阅读
红霉素和林可霉素常用于防治蜜蜂幼虫病，但由于尚没有针对蜂群的休药期以及蜂业生产中循环使用巢脾等原因，巢脾及各类蜂产品中红霉素和林可霉素超标现象比较常见。本研究的目的是建立一套适用于蜂蜜、巢脾及蜂体中红霉素和林可霉素残留量测定的分析方法，研究探明用药后这两种药物在蜂蜜、巢脾及蜂体中的变化规律，以及蜂蜜加工和贮藏过程中的降解规律，从而为养蜂用药剂量和休药期的制定、蜂蜜加工和贮藏条件的选择提供理论依据。本研究主要分为三个部分，第一部分建立了蜂蜜、巢脾及蜂体中红霉素和林可霉素残留量的HPLC-MS/MS分析方法。对样品前处理及分离条件进行优化，样品经过提取溶剂（三羟甲基氨基甲烷（Tris）与氯化钙（CaCl2）的混合溶液（pH=9.0））提取，经Oasis HLB固相萃取柱净化后采用高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）测定。该方法对流动相体系、色谱和质谱相关参数进行了选择优化。结果表明：在0.5μg/kg-20μg/kg范围内，红霉素和林可霉素具有良好的线性关系，红霉素和林可霉素的相关系数（r）分别为0.9905和0.9997。两种药物的方法检出限均为0.1μg/kg。在空白蜂蜜、巢脾和蜜蜂样品中添加三个浓度水平的红霉素和林可霉素的混合标准溶液，回收率和相对标准偏差均满足残留分析方法的要求。第二部分研究了蜂群用药后，蜂蜜、巢脾及蜂体中红霉素和林可霉素的变化规律，比较了蜂蜜、巢脾及蜂体红霉素和林可霉素变化规律的差异。结果表明：巢脾、蜂体中红霉素和林可霉素达到浓度最大值的时间基本相同，分别为喂药后3-8d和0-3d左右，而蜂蜜中林可霉素比红霉素更快达到浓度的最大值，分别为喂药后13d和23d左右，其原因可能是林可霉素比红霉素更易在蜂蜜和水中溶解。参考可食性动物组织中红霉素和林可霉素限量要求（200μg/kg和100μg/kg），在本实验条件下，建议蜂群红霉素最大喂药量为10mg/足框蜂，而因林可霉素更为稳定、难分解，其最大喂药量应小于10mg/足框蜂。同时，本实验的结果为蜂群使用红霉素和林可霉素休药期的设定提供了一定的理论依据。第三部分研究了不同加工条件和贮藏条件下蜂蜜中红霉素和林可霉素的降解规律。研究发现红霉素在蜂产品常用加工温度（50℃-70℃）中极不稳定，容易降解，而林可霉素则较稳定。在贮藏实验中发现红霉素在贮藏过程中易降解，而林可霉素浓度则变化很小。因而即使原蜜中含有少量超标的红霉素也可以在后期的加工和贮藏过程中降解，使其符合相关标准，但要控制蜂蜜中林可霉素的含量只能通过减少养蜂过程中林可霉素的使用剂量。