表达BAC单链抗体克隆的构建

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangyao366
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该实验拟在上述理论基础上制备BAC5单链抗体,扩增出鼻咽癌单抗BAC5的轻重链可变区基因,利用一段编码连接肽(GGGGS)3连接轻重链基因,并进行测序,上GENEBANK/NCBI网查询了解到此抗体基因为I gG型抗体,同源率达到96%,设计引物后使SCFV插入pET-22b载体后转入表达菌体BL21(DE3)进行表达,用I PTG进行诱导表达,判断其有无活性,初步探索表达的最优条件,SDS-PAGE进行分析,We st ern-bl otti ng进行确定,该实验旨在为该课题的单链抗体的连接核素导向治疗提供基础.总结1、构建鼻咽癌单克隆抗体BAC5的单链抗体.2、初步探索此单链抗体的表达最优条件
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目的:检测骨髓增生异常综合征(MDS)p15基因甲基化状态;探讨5-氮杂-2-脱氧胞嘧啶(decitabine)和三氧化二砷(arsenic trioxide,AsO)对MDS患者体外培养细胞的去甲基化作用.方法:采用限制性内切酶联合PCR方法检测MDS患者骨髓单个核细胞p15基因甲基化状态,并以β-globin(β珠蛋白)基因扩增产物作为试验内参照,分析其甲基化率.体外培养经检测p15基因高度甲
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