【摘 要】
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利用甘薯品种高系14号、玉丰、新大紫、高自1号、农大红和栗子香,对甘薯细胞悬浮培养系的建立进行了研究.将长约0.5mm的茎尖组织培养在添加2.0mg/L2,4-D的MS培养基上,诱导得
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利用甘薯品种高系14号、玉丰、新大紫、高自1号、农大红和栗子香,对甘薯细胞悬浮培养系的建立进行了研究.将长约0.5mm的茎尖组织培养在添加2.0mg/L2,4-D的MS培养基上,诱导得到了胚性愈伤组织.胚性愈伤组织诱导的频率因基因型不同而有明显差异.培养8周后,将获得的胚性愈伤组织悬浮于含有2.0mg/L2,4-D的MS的液体培养基中,获得了增殖迅速、分散程度良好的胚性细胞悬浮培养系.悬浮培养20周后,每隔4周,将直径达到0.8-1.0mm的胚性细胞团转移到添加2.0mg/L2,4-D的MS固体培养基上进行胚性愈伤组织的增殖并诱导体细胞胚.将增大的胚性愈组织连同其上的细胞胚一起转移到添加1.0mg/LABA的MS培养基上,体细胞发育成熟并发芽形成植株.将获得的小植株转移到MS基本培养基上,获得了完整植株,且这些植株开形态学上的变异.悬浮培养24-28周后,6个品种的胚性细胞团的植株再生率达到100%.这样的一个具有高频率的植株再生、适用于不同基因型的胚性细胞悬浮培养系为利用生物工程技术改良甘薯提供了一个强有力的研究手段.该研究对甘薯的近缘野生种I.triloba为材料,以IBA4404、GV3111SE、A2083SE和EHA101为供体菌系,对甘薯叶盘法转化的基本条件进行了初步研究.这些菌系所携带的pB1121质粒上均含有卡那霉素抗性基因(NPTⅡ)和β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS).结果表明,最适宜的共培养时间为4-5天,农杆菌菌系EHA101的转化频率较高.用LBA4404对I.triloba的叶盘进行转化获得了抗Kan的转化植株.利用LBA4404与栗子香悬浮培养的细胞团共培养,得到了GUS阳性反应的转化愈伤组织.
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