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目的：
1.探索体成分、血清性激素及性激素结合蛋白（sex hormone binding globulin，SHBG）水平对绝经后女性骨密度（bone mineral density，BMD）及骨质疏松症（osteoporosis，OP）的影响；
2.初步筛选在骨量正常者与OP患者间具有显著差异的DNA甲基化基因位点，借助生信平台定位目标基因，为后续验证实验及功能研究提供基础。
方法：
1.根据纳入与排除标准，招募235名49～65岁宁波市汉族绝经后女性为研究对象。问卷调查收集人口学特征、既往疾病史、用药史等；用双能X线吸收仪（dual-energy X ray absorptiometry，DXA）测定瘦体重（lean mass，LM）、瘦体重百分比（LM%）、脂肪质量（fat mass，FM）、脂肪质量百分比（FM%）及全身（total body BMD，T-BMD）、脊柱（total spine BMD，S-BMD）、全髋（hip bone mineral density，H-BMD）、第1-4腰椎（L1-L4bone mineral density，L1-4BMD）和股骨颈骨密度（femoral neck bone mineral density，FN BMD）；用电化学发光法检测血清总睾酮（total testosterone，TT）和SHBG，并计算游离睾酮（free testosterone，FT）。
2.从研究人群中筛选年龄和体重指数（body mass index，BMI）匹配的5例OP患者及5例骨量正常者（对照组），提取其全血DNA并采用Illumina BeadArray Infinium芯片技术检测外周血全基因组DNA的甲基化水平。对差异具有统计学意义的甲基化基因进行基因本体（Gene Ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）信号通路分析及蛋白质相互作用网络调控（protein-protein interaction network，PPI network）分析。
结果：
1.LM、FM和FM%与各部位BMD均呈正相关（r=0.282~0.551，P均＜0.05）,而LM%与BMD呈负相关（r=-0.244~-0.371，P均＜0.01）；控制年龄、体重和身高后，LM、LM%与各部位BMD相关性无统计学意义（P均＞0.05）；但FM与S-BMD（r=0.155，P=0.019）和H-BMD（r=0.132，P=0.048）仍呈正相关，并且FM%与FN BMD（r=0.132，P=0.048）、H-BMD（r=0.149，P=0.025）和S-BMD（r=0.153，P=0.021）的相关性仍具有统计学意义；
2.SHBG与L1-4BMD（r=-0.355，P＜0.001）和FN BMD（r=-0.303，P＜0.001）均呈负相关。多元线性逐步回归模型显示，校正BMI和年龄后，SHBG与L1-4BMD（r=-0.170，P=0.010）和FN BMD（r=-0.131，P=0.045）仍呈负相关，而FT未进入模型，SHBG水平独立解释了2.0%的L1-4BMD的变异和1.4%的FN BMD的变异；
3.高、中、低SHBG水平组OP患病率分别为43.6%、19.0%和15.4%，高SHBG水平组患病风险为中SHBG水平组的3.58倍（P=0.001）和低SHBG组的4.25倍（P=0.001）；校正BMI和FT后差异仍显著，分别为中SHBG水平组的2.65倍（P=0.020）和低SHBG组的3.35倍（P=0.015）。
4.发现存在差异的DNA甲基化位点198个，其中上调的113个，下调的85个；基因注释后发现OP组与对照组之间具有甲基化差异的基因共104个，其中高甲基化基因69个，低甲基化基因35个。差异的甲基化位点主要位于CpG openseas区及Body区域。
5.借助生物信息技术平台分析甲基化差异基因，发现差异基因编码的蛋白可位于细胞外区、质膜部分，与钙离子结合、热休克蛋白结合、阳离子结合等功能相关，主要参与细胞黏附、细胞应激等过程，并与维生素B6代谢、胰岛素抵抗等7条信号通路相关。
结论：
1.绝经后女性肌肉比例或力量的增加并不能有效提高骨强度，而一定程度的体脂累积对老年骨具有保护作用；
2.T对绝经后女性骨量累积无独立影响或影响微弱，而高SHBG水平是绝经后女性人群OP的独立风险因素，监测外周血SHBG水平可能有助于预测绝经后女性骨质丢失与OP严重程度；
3.与正常对照相比，OP患者外周血DNA有198个位点存在甲基化修饰差异，涉及104个基因。其中，CYP2A7、COL4A2、FGF12、PRKAG2、PTEN、FMOD、FGFR2的甲基化异常可能与OP发病机制有关。
1.探索体成分、血清性激素及性激素结合蛋白（sex hormone binding globulin，SHBG）水平对绝经后女性骨密度（bone mineral density，BMD）及骨质疏松症（osteoporosis，OP）的影响；
2.初步筛选在骨量正常者与OP患者间具有显著差异的DNA甲基化基因位点，借助生信平台定位目标基因，为后续验证实验及功能研究提供基础。
方法：
1.根据纳入与排除标准，招募235名49～65岁宁波市汉族绝经后女性为研究对象。问卷调查收集人口学特征、既往疾病史、用药史等；用双能X线吸收仪（dual-energy X ray absorptiometry，DXA）测定瘦体重（lean mass，LM）、瘦体重百分比（LM%）、脂肪质量（fat mass，FM）、脂肪质量百分比（FM%）及全身（total body BMD，T-BMD）、脊柱（total spine BMD，S-BMD）、全髋（hip bone mineral density，H-BMD）、第1-4腰椎（L1-L4bone mineral density，L1-4BMD）和股骨颈骨密度（femoral neck bone mineral density，FN BMD）；用电化学发光法检测血清总睾酮（total testosterone，TT）和SHBG，并计算游离睾酮（free testosterone，FT）。
2.从研究人群中筛选年龄和体重指数（body mass index，BMI）匹配的5例OP患者及5例骨量正常者（对照组），提取其全血DNA并采用Illumina BeadArray Infinium芯片技术检测外周血全基因组DNA的甲基化水平。对差异具有统计学意义的甲基化基因进行基因本体（Gene Ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）信号通路分析及蛋白质相互作用网络调控（protein-protein interaction network，PPI network）分析。
结果：
1.LM、FM和FM%与各部位BMD均呈正相关（r=0.282~0.551，P均＜0.05）,而LM%与BMD呈负相关（r=-0.244~-0.371，P均＜0.01）；控制年龄、体重和身高后，LM、LM%与各部位BMD相关性无统计学意义（P均＞0.05）；但FM与S-BMD（r=0.155，P=0.019）和H-BMD（r=0.132，P=0.048）仍呈正相关，并且FM%与FN BMD（r=0.132，P=0.048）、H-BMD（r=0.149，P=0.025）和S-BMD（r=0.153，P=0.021）的相关性仍具有统计学意义；
2.SHBG与L1-4BMD（r=-0.355，P＜0.001）和FN BMD（r=-0.303，P＜0.001）均呈负相关。多元线性逐步回归模型显示，校正BMI和年龄后，SHBG与L1-4BMD（r=-0.170，P=0.010）和FN BMD（r=-0.131，P=0.045）仍呈负相关，而FT未进入模型，SHBG水平独立解释了2.0%的L1-4BMD的变异和1.4%的FN BMD的变异；
3.高、中、低SHBG水平组OP患病率分别为43.6%、19.0%和15.4%，高SHBG水平组患病风险为中SHBG水平组的3.58倍（P=0.001）和低SHBG组的4.25倍（P=0.001）；校正BMI和FT后差异仍显著，分别为中SHBG水平组的2.65倍（P=0.020）和低SHBG组的3.35倍（P=0.015）。
4.发现存在差异的DNA甲基化位点198个，其中上调的113个，下调的85个；基因注释后发现OP组与对照组之间具有甲基化差异的基因共104个，其中高甲基化基因69个，低甲基化基因35个。差异的甲基化位点主要位于CpG openseas区及Body区域。
5.借助生物信息技术平台分析甲基化差异基因，发现差异基因编码的蛋白可位于细胞外区、质膜部分，与钙离子结合、热休克蛋白结合、阳离子结合等功能相关，主要参与细胞黏附、细胞应激等过程，并与维生素B6代谢、胰岛素抵抗等7条信号通路相关。
结论：
1.绝经后女性肌肉比例或力量的增加并不能有效提高骨强度，而一定程度的体脂累积对老年骨具有保护作用；
2.T对绝经后女性骨量累积无独立影响或影响微弱，而高SHBG水平是绝经后女性人群OP的独立风险因素，监测外周血SHBG水平可能有助于预测绝经后女性骨质丢失与OP严重程度；
3.与正常对照相比，OP患者外周血DNA有198个位点存在甲基化修饰差异，涉及104个基因。其中，CYP2A7、COL4A2、FGF12、PRKAG2、PTEN、FMOD、FGFR2的甲基化异常可能与OP发病机制有关。