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目的：检测弓形虫（Toxoplasma gondii, TG）Prugniaud株单独或联合卡介苗（BCG）作用后对小鼠恶性黑色素瘤的抑制作用效果，并尝试从不同侧面探讨其作用机制，为筛选可能具有诱发非特异性免疫保护作用的组分提供新的线索。 方法：将绿色荧光标记的转基因小鼠GFP C57/B6接种B16细胞，建立荷瘤模型，将荷瘤小鼠随机分为4组，每组9只；两天后，TG/BCG/B16组腹腔接种弓形虫Prugniaud株（TG）和卡介苗（BCG），TG/B16组接种Prugniaud株， BCG/B16组接种 BCG，B16组接种生理盐水（NS），观察抑瘤效应。1、隔日测量肿瘤体积、三周后处死小鼠剥离肿瘤称重、计算抑瘤率。2、MTT实验检测脾细胞体外与 B16细胞在不同效靶比下杀伤肿瘤活性。3、各同组小鼠血清分别与B16细胞体外作用36小时后，比较作用效果①DNA-Ladder实验检测细胞凋亡；②HE染色镜检各组细胞形态。4、HE染色法对各组的肿瘤组织进行病理形态学对比观察。5、免疫组化法检测各组肿瘤血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）。6、RT-PCR法检测各组肿瘤组织VEGF mRNA的表达。7、流式细胞仪检测各组小鼠肿瘤细胞的凋亡率。 结果：1、B16、BCG/B16、TG/B16、TG/BCG/B16四组小鼠瘤重分别为（3.237±0.552）g、（2.461±0.320）g、（1.521±0.263）g、（1.069±0.444）g；各实验组抑瘤率分别为：BCG/B16：23.95％、TG/B16：53.01%、TG/BCG/B16：66.98%，各组之间差异有统计学意义（P<0.05）。2、各组脾细胞杀伤活性随着效靶细胞比的增加而增强，在效靶比为50:1时下杀伤率达到最大，分别为 B16：（8.30±2.63）%、BCG/B16：（28.40±4.22）%、TG/B16：（44.80±2.99）%、TG/BCG/B16：（55.72±3.09）%，其差别有统计学意义（P<0.05）。3、不同组鼠血清体外和B16细胞作用后：①DNA-Ladder实验，弓形虫感染组TG/B16组和TG/BCG/B16组的DNA都出现了梯形状条带，而BCG/B16组和B16组则没有；②HE染色镜检，感染组血清培养的细胞密度降低，细胞核出现浓染、核固缩。4、肿瘤组织病理形态学观察可见弓形虫感染组有不同程度的肿瘤坏死区。5、免疫组化检测小鼠肿瘤组织VEGF蛋白的表达，四组表达量分别为B16：（79.67±5.43）%、BCG/B16：（68.22±5.21）%、TG/B16：（41.89±4.94）%、TG/BCG/B16：（33.22±4.84）%，各组间差异有统计学意义（P<0.05）。6、免疫组化法计数各组肿瘤组织 MVD， BCG/B16：(19.44±2.79)条、TG/B16：(10.78±2.86)条、TG/BCG/B16：(6.56±2.07)条，少于阴性对照组(23.56±4.13)条，差异均具有统计学意义（P<0.01）。7、RT-PCR法检各组 VEGF mRNA的相对表达量， VEGF120：B16（0.253±0.020）、BCG/B16（0.233±0.012）、TG/B16（0.167±0.011）、TG/BCG/B16（0.140±0.015）各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）；VEGF164：B16（0.276±0.013）、BCG/B16（0.255±0.220）、TG/B16（0.190±0.015）、TG/BCG/B16（0.171±0.011）各组差异均具有统计学意义（P<0.01）。8、流式细胞术检测各组凋亡率 B16（7.37±1.30）%、B16/BCG（9.27±1.19）%、B16/TG（24.17±2.21）%、B16/TG/BCG（45.22±2.15）%。B16与 B16/BCG组比较无明显差异，弓形虫感染组（B16/TG组和B16/TG/BCG组）与B16组相比较凋亡率要高，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论：1、弓形虫Prugniaud株感染对小鼠体内种植的黑色素瘤有抑制生长和诱导凋亡的作用，并可被BCG增强。 2、弓形虫Prugniaud株感染可增强脾细胞杀伤活性，并且在BCG联合作用下效果得到增强。 3、弓形虫Prugniaud株感染的小鼠血清可诱导体外培养的B16细胞凋亡，并且在BCG联合作用下效果得到增强。 4、弓形虫Prugniaud株感染降低VEGF mRNA及蛋白水平的表达量和MVD，并且在BCG联合作用下效果得到增强。