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本试验在给小鼠腹腔注射大肠杆菌菌液,建立小鼠大肠杆菌病模型的基础上,筛选出对大肠杆菌病有良好治疗效果的中药复方吴茱萸汤,进行了吴茱萸汤对小鼠大肠杆菌病的疗效试验,观察了不同剂量的吴茱萸口服液的治疗效果,并采用体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞的方法,研究了大肠杆菌耐热肠毒素(ST)对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌NO、ET-1的影响,以及吴茱萸汤保护大鼠肠黏膜微血管内皮细胞免受大肠杆菌毒素ST损伤的机理。试验结果表明:1.吴茱萸汤高剂量组、中剂量组对人工感染小鼠大肠杆菌病的治愈率为60%,与攻毒对照组和低剂量组比均有显著差异(P<0.05),说明吴茱萸汤对试验性大肠杆菌病具有良好的治疗效果。2.在人工培养的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞中添加0.1ug/ml的大肠杆菌耐热肠毒素(ST),先是引起肠黏膜微血管内皮细胞NO分泌和释放量显著减少,3-9h后则极显著增加(P<0.01):而ET分泌量在在1-6h都显著增加(P<0.05)。表明ST对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞具有直接损伤作用。
3.80ug/ml吴茱萸汤可以使微血管内皮细胞分泌NO、ET-1都极显著升高(P<0.01),且不损伤微血管内皮细胞,所以以此作为治疗剂量。
4.在经过0.1ug/ml大肠杆菌耐热肠毒素处理后的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞中加入80ug/ml的吴茱萸汤,可显著降低微血管内皮细胞分泌的NO含量(P>0.05),说明吴茱萸汤能够抑制由ST所诱导的NO分泌。
5.用80ug/ml吴茱萸汤处理肠黏膜微血管内皮细胞,1h后再加0.1ug/ml的耐热肠毒素,肠黏膜微血管内皮细胞分泌NO和空白对照组无显著差异(P>0.05),表明吴茱萸汤是通过影响肠黏膜微血管内皮细胞NO的分泌而起到保护肠黏膜微血管内皮细胞免受ST损伤的。