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背景： 骨肉瘤又名成骨肉瘤，是青少年及儿童最常见的恶性骨肿瘤，具有恶性度高、生长迅速、早期转移等特点，发病率约占原发性骨恶性肿瘤15%和恶性肿瘤的0.2%[1]，小儿患者发病率甚至达到5%[2]。早期骨肉瘤患者症状较轻，不易察觉，但当以症状就诊时，大部分已是中晚期。随着对骨肉瘤发病机制的深入研究，以及现代新型辅助化疗和外科治疗相结合下，骨肉瘤的治疗获得一定进展，但5年生存率约60%[3]，其中约50%患者已出现肺转移，而肺转移患者5年生存率更是只有10%-25%[4-8]。 近30年以来，通过许多国际研究机构的多方努力，骨肉瘤治疗已从挽救生命发展到挽救生命的同时最大限度保留患肢功能，但是5年生存率仍然没有很明显提高，止步于60%左右，仿佛进入到了骨肉瘤临床治疗的瓶颈期。目前临床一线抗肿瘤药物如顺铂、氧氮磷环类异环磷酰胺、二氢叶酸还原酶抑制剂甲氨蝶呤、蒽环类阿霉素等，目的在于诱导肿瘤细胞凋亡，然而肿瘤细胞通过自噬通过产生很强的凋亡抑制作用，进而导致细胞耐药[9-13] ，临床发现肿瘤细胞耐药也会对结构和功能相似的药物产生交叉耐药性，化疗方案的推广受到前所未有巨大挑战；与此同时，为进一步控制肿瘤细胞进展，激进的化疗方案所带来的副作用，也促使许多骨肉瘤患者难以坚持完成化疗。为此，对骨肉瘤的深入研究迫在眉睫。 寻找一种新型抗肿瘤药物，逆转骨肉瘤耐药，对骨肉瘤患者临床治疗和降低复发转移率有重要意义，是目前研发新型抗肿瘤药物的难点和热点。 目的： 我们前期研究证实氯化镉通过产生大量活性氧进而活化p38 MAPK、抑制ERK1/2通道最终对MG63细胞产生毒性作用[14]，在此基础上，进一步研究氯化镉对抑制骨肉瘤生长的作用机制。本研究通过MG63细胞在不同浓度氯化镉作用下细胞活力、迁移能力、凋亡周期等进一步研究，有望将氯化镉作为化疗药物为骨肉瘤治疗提供新的参考方法。 方法： 本文目前采用五个实验分别从不同角度证实氯化镉对MG63细胞的作用。实验一利用CCK-8法检测MG63细胞增殖能力，即通过检测不同时间段MG63细胞系及阴性对照组细胞的细胞活性，观察CdCl2对MG63细胞增殖能力的影响。实验二利用Transwell方法通过检测不同时间段MG63细胞系及阴性对照组细胞的细胞穿膜数量，以此观察CdCl2对MG63细胞迁移能力影响。实验三将CdCl2及阴性对照序列转染MG63细胞系后，应用AnnexinⅤ/PI双染色后，通过流式细胞术检测细胞凋亡周期及其比率的变化，以便观察CdCl2对MG63细胞凋亡的影响。实验四和五通过RT-PCR和Western Blot技术检测凋亡蛋白表达水平的变化，分析CdCl2对基因的调节作用。 结果： 实验一应用CCK8法检测MG63细胞增殖，测得CdCl2作用最佳时间是48h， CdCl2最大模型浓度为1mg/L。实验二应用Transwell法检测MG63细胞迁移能力，结果提示在标准品氯化镉作用下，随时间增长，MG63细胞迁移能力增加。实验三应用Annexin V/PI双染法检测细胞周期及细胞凋亡，结果提示在细胞周期的G2和S期与未经CdCl2处理组差异有统计学意义。实验四Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白，结果显示Bc12、BAX表达蛋白差异具有统计学意义。实验五应用qRT-PCR检测金属硫蛋白mRNA的表达，结果提示CdCl2作用下MG63细胞金属硫蛋白mRNA表达差异具有统计学意义。 结论： 骨肉瘤组织中金属硫蛋白mRNA表达升高，Bcl-2、Bax的表达水平升高；过表达的金属硫蛋白mRNA能够抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移；Bcl-2、Bax可能是金属硫蛋白mRNA的靶基因之一，金属硫蛋白mRNA可介导Bcl-2、Bax的表达水平；氯化镉可诱导骨肉瘤细胞凋亡，其机制可能与金属硫蛋白mRNA介导的Bcl-2、Bax表达上调有关。