两种人肠道病毒病毒样颗粒的制备与鉴定

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肠道病毒属(enterovirus,EV)属于小RNA病毒科,包括柯萨奇病毒(coxsackievirus,Cox)、新型肠道病毒(EV68-102)、脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)和埃柯病毒(Echovirus)。其中,EV72目前被重命名为甲肝病毒(hepatitis virus A,HAV)。甲肝病毒是引起以肝脏损害为主的肠道传染病。我国是甲型肝炎的高发流行区,政府对甲肝预防亦是高度重视。目前,在我国应用的甲肝预防性疫苗有减毒活疫苗和灭活疫苗。这些疫苗的推广和应用对控制甲肝的传播与流行做出了重要贡献。CoxA16是引起患者手足口病(hand footmouth disease,HFMD)的主要病原体之一,同时该病毒还能引起疱疹性咽峡炎、脑膜脑炎等严重疾病,威胁了幼儿的生命健康。据报导,2012年第一季度北京市报告手足口病例比去年同期上升了216.67%,并且病原学监测中以CoxA16为主。目前,还没有针对CoxA16感染的特效药或疫苗上市。因此,依据当前HAV和CoxA16均没有基因工程重组疫苗的现状,本论文针对HAV和CoxA16开展基于病毒样颗粒的基因工程疫苗的探索研究。本论文选用了两种表达系统来制备HAV和CoxA16病毒样颗粒(virus-likeparticle,VLP)。第一,选择昆虫杆状病毒表达系统来表达HAV的VLP。将HAV的P1和3ABC基因重组到杆状病毒中并在昆虫细胞中共表达,电镜观察在昆虫细胞中可产生HAV VLP。第二,选择了酿酒酵母表达系统发酵表达CoxA16的VLP。将CoxA16的P1和3CD蛋白在酿酒酵母中共同表达,电镜观察可产生CoxA16的VLP。本论文得到了HAV和CoxA16的VLP。为研究预防甲肝病毒和科萨奇A16病毒感染的基因工程疫苗进行有益的探索。
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