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环介导等温扩增技术自2000年报道以来,吸引了不同领域研究者们的广泛关注。LAMP技术在等温条件下,通过四条引物特异性识别靶基因的六个区域,使得LAMP扩增的特异性、灵敏度非常高。反应不需要借助任何专业设备以及繁琐的程序,可视化检测手段的应用使得LAMP检测结果清晰明确,目前已经广泛应用于人畜病原物、食品安全和环境卫生的检测中。根结线虫是一类非常重要的植物病原线虫,广泛分布世界各地,寄主范围十分广泛,造成作物的大规模减产。其中南方根结线虫(M. incognita)、爪哇根结线虫(M. javanica)、花生根结线虫(M. arenaria)和北方根结线虫(M. hapla)是四种最重要的根结线虫,在我国分布最为广泛。北方根结线虫在我国是花生根结线虫病的主要病原物,每年造成严重的减产,建立一套快速准确的检测方法,对防治北方根结线虫病具有重要的意义。本研究以环介导等温扩增法对植物罹病组织中的北方根结线虫进行检测。其中,北方根结线虫LAMP特异性引物是根据北方根结线虫与其他根结线虫ITS差异进行设计。北方根结线虫LAMP检测技术的最低检测限达到1/200000头线虫,灵敏度是常规PCR的100倍,这使得该方法可以直接从植物组织中检测北方根结线虫。同时,北方根结线虫LAMP检测具有高度的特异性,可以将北方根结线虫与其他近缘种线虫区分出来。该检测精确、简便、低成本,LAMP反应产物滴加SYBR Green Ⅰ核酸染料后可以用肉眼直接观察判断,也可以用LFD试纸进行直观判断,适宜在田间应用。抗草甘膦转基因大豆是目前全球种植范围最广的转基因作物,有超过1000种品种正在种植。中国虽然没有批准转基因大豆的商业化种植,但是,作为全球最大的大豆进口国,转基因大豆不可避免的经常流入国内市场。而近年来随着新闻广泛宣传,公众越来越关心转基因食品的安全问题,建立一套可靠、严谨而又简便的检测技术势在必行。本研究将LAMP技术应用到抗草甘膦转基因大豆的检测中。针对转基因大豆的外源基因CP4-EPSPS设计了六条特异性引物。并对LAMP反应条件进行优化,优化结果如下：扩增时间45min,6mmol/L的dNTPs和3mmol/L的Mg2+,反应体系25μL。反应产物添加SBRY Green Ⅰ染色后可以直接肉眼观察。LAMP法检测抗草甘膦转基因大豆的灵敏度是常规PCR的100倍。与常规PCR相比,抗草甘膦大豆LAMP检测法更加快速、方便和精确。因此,该法可以作为抗草甘膦大豆检测的一个有力的工具并且可以直接应用于基因漂移的田间监测。