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目的苯丙酮尿症（phenylketonuria,PKU; OMIM 261600）是新生儿常规筛查项目之一,其绝大多数患者是由于苯丙氨酸羟化酶（phenylalanine hydroxylase,PAH;uc001tjq.1）基因突变,导致PAH酶活性降低或丧失,使得苯丙氨酸不能转化为酪氨酸,在体内大量积蓄而致病。本研究应用高分辨熔解曲线分析（High Resolution Melting,HRM）技术检测PAH基因突变并用于PKU家系的快速产前诊断,旨在探讨苯丙酮尿症基因诊断和产前诊断的新方法,并进一步丰富中国人PAH基因突变谱。研究对象与方法1、研究对象采集21例PKU患者及其父母外周血样本（其中患者16、17为同卵双胞胎）,以及其中2个家系的产前诊断羊水样本各1例。50例正常对照样本经测序验证不含PAH基因突变。所有样本均来自广州市妇女儿童医疗中心。2、方法本研究中,我们采用高分辨熔解曲线分析（High Resolution Melting,HRM）技术作为初筛工具,对21例PKU患者进行了PAH基因13个外显子及外显子-内含子交界区的突变筛查,并经测序验证。在明确家系15和16先证者及其父母的致病突变后,将2例风险胎儿样本分别与其父母及先证者一起进行相应片段的熔解曲线分析,并经测序验证。结果1、在本研究中,共检出29种突变,其中错义突变15种,无义突变4种,剪切突变3种,缺失突变2种,中性突变3种,1种单核苷酸多态点,和1种特殊的移码突变（ c.188196delCCCACATTG/c.197?insA ）。而c.188196delCCCACATTG/c.197?insA, I94V（c.280A>G）, Q160X（c.478C>T）, H264R（c.791A>G）, E305K（c.913G>A）, G312V（c.935G>T）为新发现的突变。2、在21例PKU患者中,检出2个致病突变的有19例,检出3个致病突变的有2例。家系15风险胎儿未发现致病突变,家系16风险胎儿诊断为携带者。3、对比HRM与DNA测序结果,采用HRM对21例患者和2例风险胎儿的检测分析未出现假阳性及假阴性结果。因此,本研究中HRM突变筛查的敏感性和特异性均为100%。结论1、本研究证实了HRM技术是一种简单、准确、快速、高通量、低成本的遗传学分析方法,不仅可用于PAH基因的突变筛查,还特别适用于父母突变已知的PKU家系的快速产前诊断。2、本研究丰富了中国人PAH基因突变谱。