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该文针对癌转移-这一引起肿瘤病人死亡的主要原因,研究了来自茶叶的天然成分-一表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)抑制癌转移的效果并对其调控机制进行了初步的探讨.体外试验中,选择40μM以内的浓度,处理人肝癌细胞SMMC-7721细胞和肺癌细胞95-D细胞,研究EGCG抑制这两种癌细胞体外转移的效果.在软琼脂克隆形成试验中,EGCG剂量依赖性抑制SMMC-7721细胞形成克隆,30 μM EGCG完全抑制了SMMC-7721细胞的克隆形成;在"创伤"试验中,40 μM EGCG对SMMC-7721细胞移动的抑制大约能到达90％,40μM EGCG对95-D细胞移动的抑制大约能到达84.6％;在培养小室模型中,40μM EGCG对95-D细胞的浸润能力的抑制率达到76.3％;EGCG以剂量依赖的方式抑制95-D细胞粘附到Matrigel.以上试验显示:EGCG对癌细胞的克隆形成能力、浸润能、移动能和总粘附能力多个靶点有干预作用,说明EGCG可以通过抑制癌细胞转移的多个细节过程,有效地抑制癌细胞体外转移的作用.利用黑色素瘤细胞B16BL6形成肺部转移的模型,以目前临床上用于治疗恶性黑色素瘤患者的药物-Dacarbazine为阳性对照,考察EGCG在体内抑制癌转移的效果,结果表明:腹腔注射50 mg/kg的EGCG显示71.7％(p<0.01)的抑制效果.提示:作为一种天然、低毒的化合物,EGCG在癌转移的研究治疗领域具有一定的价值.使用一种二氯二氢荧光素衍生物-CDCFH,作为荧光探针来定量测定EGCG对细胞的ROS水平的影响,从抗氧化的角度探讨EGCG抑制癌转移的可能机理.实验结果显示:EGCG可以呈剂量依赖性的降低癌细胞内的ROS水平,40μM EGCG处理95-D细胞,ROS水平下降到未经药物处理时的20％.另外,用10 μM EGCG、1O μM AA(Ascorbic acid)和10 μM EGCG+1O μM AA分别处理人肝脏癌细胞SMMC-7721细胞,首次发现EGCG和Vc表现出协同抑制癌细胞内的ROS水平的作用,并协同抑制SMMC-7721细胞移动能和克隆形成.这些试验结果,充分证明:EGCG清除ROS参与介导了EGCG抑制癌转移的作用.为了深入探索EGCG的作用机理,进一步研究了与ROS相关的信号通路.通过RT-PCR和Western-blot方法证明:EGCG剂量依赖性的抑制NF-kB进入细胞核以及MMP-9的转录和表达.结合体外试验的结果,我们提出并证明:EGCG-这一天然的抗氧化剂可以通过抑制癌细胞内的ROS水平,抑制NF-kB的活化,进而下调MMP-9的表达,发挥其抑制癌转移的作用.通过RT-PCR和Western-blot方法证明,EGCG剂量依赖性的抑制RhoA的转录和表达.该实验结果第一次说明:EGCG从分子水平调节RhoA的表达,是其抑制癌转移的重要机理之一.