【摘 要】
：
目的：通过生物合成shRNA干扰沉寂P388D1细胞P2X7受体的表达，观察其与P388D1细胞淋巴道转移潜能的相关性。方法：1．P388D1细胞P2X7受体表达的鉴定采用RT-PCR，免疫荧光以及流式细胞检测技术。2．ShRNA转染沉寂P388D1细胞P2X7受体表达采用转染试剂将shRNA转染P388D1细胞株。细胞密度达约50％融合时准备转染，方法同转染试剂说明书。3．转染成功的细胞鉴定采用
论文部分内容阅读
目的：通过生物合成shRNA干扰沉寂P388D1细胞P2X7受体的表达，观察其与P388D1细胞淋巴道转移潜能的相关性。
方法：
1．P388D1细胞P2X7受体表达的鉴定采用RT-PCR，免疫荧光以及流式细胞检测技术。
2．ShRNA转染沉寂P388D1细胞P2X7受体表达采用转染试剂将shRNA转染P388D1细胞株。细胞密度达约50％融合时准备转染，方法同转染试剂说明书。
3．转染成功的细胞鉴定采用RT-PCR，免疫荧光以及流式细胞检测技术。
4．P388D1细胞淋巴道转移实验实验DBA/2小鼠(雌雄各半)24只分为四组，分别为转染P2X7R shRNA组、转染阴性对照shRNA组、兔IgG封闭抗P2X7多克隆抗体组、兔IgG封闭P2X7多克隆抗体阴性对照组。每只受试DBA/2小鼠足垫注射细胞6×105，观察小鼠存活率及肿瘤细胞的转移情况。
结果：RT-PCR，免疫荧光以及流式细胞检测技术检测结果显示P2X7受体存在于P388D1细胞膜上。转染成功后DBA/2小鼠淋巴道转移实验观察其抑制肿瘤转移情况，结果表明P2X7R基因表达沉默的P388D1细胞向淋巴结转移率显著低于对照组。
结论：P2X7R shRNA干扰P388D1细胞对目的基因P2X7R的表达，产生了RNA干扰现象。DBA/2小鼠淋巴道转移实验证实P2X7受体与P388D1淋巴瘤细胞的淋巴道转移具有相关性。同时为临床治疗淋巴瘤提供了理论依据和线索。
其他文献
目的：研究PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK对人肝癌细胞系SMMC-7721裸鼠移植瘤模型的靶向性治疗作用。方法：建立人原发性肝癌裸鼠皮下移植瘤模型，将荷瘤裸鼠随机分成肿瘤对照组、纯自杀基因组、丙氧鸟苷(GCV)组、PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK组4组。于瘤体内分别直接注射纯自杀基因、PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK，同时于裸鼠腹腔内注射GCV，观察不同时段皮下肿瘤的
背景：帕金森病(Parkinson disease,PD)的主要病理特征是纹状体中的多巴胺(dopamine agonist，DA)神经元变性、缺失，从而导致DA含量下降和胆碱能神经元功能亢进。有研究表明：1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(1-methy1-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyridine，MPTP)具有神经毒作用，可诱导动物出现多巴胺神经元损伤；
目的：建立大鼠脓毒症模型，观察不同时间点大鼠肝脏髓样分化蛋白2(Myeloid Differential protein-2 MD2)表达情况和NF-κB含量动态变化，并给予外源性TGFβ1干预，探讨TGFβ1对大鼠脓毒症的作用及可能机制，为临床脓毒症的治疗提供思路。方法：1、动物分组：健康雄性CL级SD大鼠120只，体重在220-250g，随机编号分为三组。对照组(假手术组)：40只，按2h、6
目的：从人脂肪组织中克隆SelS基因片段，构建pcDNA3.1-SelS真核表达载体。将pcDNA3.1-SelS瞬时转染至人脐静脉内皮细胞株(ECV304)中，分别从mRNA水平及蛋白水平检测SelS基因在ECV304细胞中的表达。瞬时转染后将ECV304细胞分为未转染组、SelS转染组(SelS高表达组)及空载体转染组，以不同浓度的过氧化氢( H2O2)损伤后，观察各组细胞损伤前后的氧化应激指
急性肺损伤(Acute Lung Injury，ALI)是一种常见危重病，病死率极高，严重威胁重症患者的生命并影响其生存质量。尽管我国重症医学已有了长足的发展，但对ALI的认识和治疗状况尚不容乐观，目前尚无有效的药物治疗方案。因此，早期发现、有效控制是治疗ALI及由其引发的急性呼吸窘迫综合征(Acute Respiratory Distress Syndrome，ARDS)的关键，这将对呼吸和危重
目的：研究增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)及由孔源性视网膜脱离引起的增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)患者玻璃体中转化生长因子β2(TGF-β2)的表达；探讨TGF-β2在增殖性玻璃体视网膜病变发生、发展过程中的作用。方法：收集PDR和PVR患者50例(50眼)，其中男性35例(35眼)，女性15例(15眼)。在PDR组15例．(15眼)，男性10眼，女性5眼；在PVR组35例(35眼)，男性28眼
目的：本实验利用大鼠中动脉缺血再灌注模型(MCAO)，以免疫组织化学方法观察脑缺血2h再灌注不同时间点转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1)和白介素-1β(Interleukin-1β)的表达，并观察NGF对其表达的影响，探讨神经生长因子(nerve growth factor)的脑保护作用，为临床应用NGF治疗脑梗死提供理论依据。方法：健康成年SD大鼠5
目的：探讨前列腺素E1(PGE1)对内毒素脂多糖(LPS)诱导的大鼠枯否细胞(Kupffer Cell,KC)分泌炎症细胞因子的影响。观察大鼠枯否细胞在LPS刺激及PGE1作用下炎症细胞因子水平及核因子-kB(NF-kB)的变化，进一步探讨PGE1的抗炎作用及其机制，为临床应用提供新的启示。方法：采用胶原酶原位循环灌注和Nycodez密度梯度离心法分离得到高纯度的大鼠枯否细胞，在过夜培养后冲洗两遍
目的：研究全麻复合硬膜外麻醉患者不同呼吸末二氧化碳分压(PETCO2)对脑电双频指数(BIS)的影响。方法：随机选择美国麻醉医师协会(American Society of Anesthesiologists，ASA)身体情况分级Ⅰ～Ⅱ级，拟行腹部手术患者30例，术前用药阿托品、鲁米那，麻醉选择全麻复合硬膜外麻醉，术中通过调节呼吸频率及潮气量等呼吸指标调整PETCO2。随机选择调整顺序35、45、
背景和目的：糖尿病是一种常见病、多发病，具有高的致残率和病死率，严重威胁人类的身体健康，给社会和家庭带来沉重的负担。炎症免疫反应与糖尿病并发症脑梗死的发生有关，在糖尿病中起重要作用。C反应蛋白(CRP)是反映机体非特异性炎症反应的敏感标志物，现认为其水平升高与脑梗死的不良预后相关，其确切的临床意义需要进一步明确。淀粉样蛋白(Aβ)是Alzheimer病(AD)脑老年斑的主要成分，Aβ(主要是Aβ4