论文部分内容阅读
脱水素(Dehydrin)是胚胎发生晚期蛋白(LEA)家族的第二类成员，它被认为在植物的抗逆过程中扮演了重要的角色。本论文主要进行了以下三部分工作，具体结果如下：
1.利用PCR技术，从籼稻9311(Oryzasativaspp.Indica)基因组中分离到一个1024bp的新的脱水素类似基因Osdhnl，此基因含有一个222bp的开放阅读框，无内含子，编码一个73个氨基酸的蛋白。该编码区包含ABRE等启动子调控元件。推测蛋白结构预测表明，OsDHNL的亲水性强，含有已知脱水素保守序列K-Segment和S-Segment的同源基序。序列分析表明其DNA序列与玉米脱水素基因dhnl序列有86％同源性。
2.RT-PCR结果表明，OsDHNL的表达受外源ABA、低温和盐诱导，而对干旱诱导不敏感。组织特异性分析表明，在正常生长的水稻各组织中，OsDHNL在根、茎、叶、幼穗中不表达，但在授粉期间的穗及其麸片中发现有表达。此外，我们还发现，在水稻成熟后期种子胚及存储的种子胚中OsDHNL也有表达。
3.将OsDHNL编码区及其反义核苷酸序列和含有35S基本启动子的改造pCAMBIA1390植物表达载体重组，农杆菌介导转化水稻中华11愈伤，获得转基因植株和T1代种子，将T1代的幼苗分别用模拟干旱、低温、盐胁迫处理。结果表明，在盐胁迫条件下的转正义植株生长优于转反义和野生型植物，而反义和野生型差异不大。
将OsDHNL编码区和pYES2酵母表达载体重组，转化酵母使其过表达。结果表明，OsDHNL改善了酵母在KCl，NaCl和山梨醇胁迫条件下的生长。
由以上结果，我们认为OsDHNL可能是水稻脱水素家族一个新的成员并且在植物的抗逆过程中扮演了重要角色。