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喉癌和下咽癌在头颈部肿瘤中较为常见，虽然恶性程度和生物学行为有差异，但由于解剖位置较为临近，所以治疗手段也比较类似。目前对于喉癌及下咽癌的信号通路及蛋白表达研究一直是热点。信号通路中关键蛋白的激活与失活对于肿瘤发生的关系极为密切，本研究通过对喉癌及下咽癌细胞进行不同的处理，研究细胞中免疫蛋白酶体亚基的诱导调控，为探索新的治疗靶点提供理论参考。 目的:通过γ射线辐照、c-Abl基因RNAi慢病毒的构建、外源性抑制剂等不同的手段处理喉癌及下咽癌细胞，研究喉癌及下咽癌细胞中免疫蛋白酶体亚基β5 i的诱导调控，并通过体外MTS细胞增殖定量检测明确免疫蛋白酶体亚基在不同的调控状态下，喉癌及下咽癌细胞对顺铂的敏感性有无差异。 方法:第一部分:喉癌JHU-o11细胞及下咽癌FaDu细胞分组后经过10Gy60Co-γ射线辐照，通过RT-PCR及Western Blot检测免疫蛋白酶体β5i亚基及其可变剪接异构体E1、E2在喉癌JHU-o11细胞及下咽癌FaDu细胞中的转录水平及蛋白表达;第二部分:构建pLK0.1-c-Abl-shRNA慢病毒质粒，诱导喉癌及下咽癌细胞中c-Abl基因的沉默，采用RT-PCR及Western Blot检测原癌基因c-Abl沉默对于细胞中免疫蛋白酶体亚基的转录及蛋白表达的影响;第三部分:用酪氨酸激酶抑制剂尼罗替尼及激活剂DPH影响c-Abl基因及蛋白表达，检测酪氨酸激酶活性的改变对免疫蛋白酶体β5i亚基的转录及蛋白表达影响;第四部分:将喉癌及下咽癌细胞加入顺铂后使用MTS试剂盒检测细胞体外增殖情况。 结果:1.γ射线辐照可使免疫蛋白酶体亚基β5i转录水平及蛋白表达水平增高，并可使其两种可变剪接异构体E1、E2中有活性的E2的比例在转录水平升高;2.对原癌基因c-Abl的表达沉默和对其产物酪氨酸激酶进行调控，均可影响喉癌下咽癌细胞中β5i亚基及其可变剪接异构体E2的转录，并可影响β5i的蛋白表达;3.RNAi组喉癌及下咽癌细胞较正常对照组(N)、阴性质粒组(Arg)在体外增殖实验对顺铂的敏感性降低，辐照组(IR)较余各组顺铂敏感性升高。 结论:γ射线辐照可显著提高免疫蛋白酶体亚基β5i的转录水平及蛋白表达;对c-Abl基因及其表达产物的调控可影响特异性亚基β5i及其可变剪接异构体的转录及蛋白表达，并可影响喉癌下咽癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性。