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目的:本课题研究黄芩苷对于豚鼠以及哮喘模型小鼠的治疗作用，并对其可能的作用机制进行初步研究。
方法:
1、黄芩苷对豚鼠离体气管的影响作用。
取离体豚鼠气管，将豚鼠气管剪成宽约3mm，长约20mm的螺旋气管条，悬挂于盛有20mlK-H营养液的恒温(37℃±0.5)的麦式浴槽中，上端接肌肉张力换能器，传入RM6240B/C生物医学信号采集处理系统，观测不同浓度的黄芩苷溶液对乙酰胆碱(Ach)或组胺(His)诱发的豚鼠气管平滑肌收缩的影响。
2、黄芩苷对豚鼠引喘潜伏期的影响作用。
30只健康豚鼠，雌性，体重200±20g，随机分为5组，于4L密闭玻璃钟罩内用乙酰胆碱及组胺混合溶液引喘，分别给予黄芩苷和阳性对照药雾化吸入后，观察豚鼠状态，记录豚鼠引喘潜伏期。
3、小鼠哮喘模型实验。
3.1、小鼠哮喘模型的制备。
48只SPF级健康BALB/c小鼠，随机分为6组，分别为正常组，模型组，阳性药组，黄芩苷低中高剂量给药组。采用卵蛋白(OVA)致敏，激发，制作小鼠支气管哮喘模型，观察记录实验动物造模前后精神状态，生理指征。第0、7天卵蛋白(OVA)致敏液腹腔注射致敏，从第14天起开始雾化吸入2％卵蛋白溶液激发，连续6天，每天一次，每次30分钟;给药组激发前1小时雾化吸入给予黄芩苷低、中、高剂量中性溶液，空白对照组致敏液，激发液，治疗药液均用0.9％生理盐水替代，第21天取材。
3.2、检测模型小鼠免疫器官脏器系数。
迅速摘取实验模型小鼠脾脏以及胸腺，记录哮喘小鼠模型试验中各组小鼠脾脏及胸腺脏器系数。
3.3、HE染色法观察各组小鼠肺脏组织的形态变化。
迅速摘取实验模型小鼠左侧肺脏，置于中性4％甲醛溶液中固定，石蜡包埋，切片，苏木精-伊红染色，观察各组哮喘模型小鼠肺脏组织的形态学变化。
3.4、ELISA(酶联吸附实验)法检测各组小鼠血清中IL-4，IFN-γ的含量。
取各组哮喘模型小鼠血，静置1小时后离心取上层血清，ELISA试剂盒检测各组哮喘模型小鼠血清中IL-4，IFN-γ的含量。
3.5、应用RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)技术检测各组小鼠IL-4，IFN-γ的mRNA的表达水平。
取实验模型小鼠右侧肺脏，提取各组模型小鼠肺脏组织总RNA，应用RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)技术检测各组哮喘模型小鼠肺脏组织中IL-4，IFN-γ的mRNA的表达水平。
结果:
1、黄芩苷对豚鼠引喘潜伏期的作用。
豚鼠引喘潜伏期实验中，黄芩苷能够延长组胺和乙酰胆碱混合喷雾所引起的豚鼠引喘潜伏期，中剂量及高剂量(15mg/ml、50mg/ml)与对照组具有显著差异(P＜0.05)，说明黄芩苷能对组胺和乙酰胆碱混合喷雾所引起的豚鼠药物性哮喘具有保护作用，能够改善乙酰胆碱和组胺引起的支气管痉挛。
2、黄芩苷对离体豚鼠气管的舒张作用。
黄芩苷对乙酰胆碱和组胺诱导的气管平滑肌收缩具有明显的拮抗作用。对于乙酰胆碱诱导的豚鼠支气管平滑肌收缩，加入黄芩苷0.046、0.092、0.184mmol/L孵育30分钟之后，可使乙酰胆碱累积浓度量效曲线右移，对豚鼠气管平滑肌的最大张力无影响，显示出黄芩苷对于乙酰胆碱具有比较显著的非竞争拮抗作用，提示黄芩苷非竞争性拮抗气管平滑肌M受体从而达到抑制乙酰胆碱引起气管平滑肌收缩的目的。对于组胺诱导的豚鼠支气管平滑肌收缩，加入黄芩苷0.046、0.092、0.184mmol/L孵育30分钟之后，可使组胺累积浓度量效曲线右移，对豚鼠气管平滑肌的最大张力无影响，提示黄芩苷能够非竞争性拮抗气管平滑肌H受体从而达到抑制气管平滑肌收缩的目的，显示出黄芩苷对于组胺拮抗作用略低于对乙酰胆碱拮抗作用。
3、黄芩苷对于哮喘小鼠免疫器官的作用。
黄芩苷能够降低胸腺指数与脾脏指数，中、高剂量组与模型组相比差异有统计学意义(P＜0.05)，说明黄芩苷能够逆转模型引起的免疫应答过程，同时改善炎症对于小鼠机体的影响。
4、黄芩苷对于小鼠支气管哮喘的治疗作用。
各组哮喘模型小鼠肺脏组织HE染色结果显示，BABL/c小鼠哮喘模型对照组和正常小鼠相比，主要表现为支气管周围炎症以及血管周围炎症。炎症细胞的类型主要为单核巨噬细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞，并可见少数淋巴细胞以及中性粒细胞。此外伴有间质性肺炎病变。给予哮喘模型小鼠黄芩苷低、中、高中性溶液雾化吸入治疗之后，能够减轻支气管哮喘的症状以及肺脏间质炎症的病变程度，其中低剂量组效果略差，中、高剂量组效果较好。
5、黄芩苷对于哮喘小鼠血清中IL-4以及IFN-γ的影响。
黄芩苷对小鼠血清中IL-4的影响:结果表明，与正常对照组相比较，哮喘模型组、黄芩苷低剂量治疗组和布地奈德阳性对照组血清中IL-4含量均明显升高(P＜0.01）。
与哮喘模型组相比:中、高剂量黄芩苷治疗组以及阳性药布地奈德治疗组血清中IL-4有明显降低(P＜0.01）。
黄芩苷对小鼠血清中IFN-γ的影响:结果表明，于正常对照组相比较，哮喘模型组、黄芩苷低剂量治疗组和布地奈德治疗组血清中IFN-γ含量均明显降低（P＜0.01）。
与哮喘模型组相比:中高剂量黄芩苷治疗组以及阳性药布地奈德治疗组血清中IFN-γ有明显升高(P＜0.01）。
6、黄芩苷对哮喘小鼠肺脏组织中IL-4以及IFN-γmRNA表达量的影响。
黄芩苷对哮喘小鼠肺脏组织中IL-4mRNA表达的影响:RT-PCR结果表明，与正常对照组相比较，哮喘模型组、黄芩苷低剂量治疗组和布地奈德治疗组肺脏组织中IL-4mRNA表达量均明显升高，(P＜0.01）。说明模型建立成功。与哮喘模型组相比:中、高剂量黄芩苷治疗组以及布地奈德阳性对照组肺脏组织中IL-4mRNA表达有明显降低。(P＜0.01)。说明黄芩苷能够降低哮喘小鼠肺脏组织中IL-4的含量。
黄芩苷对于哮喘小鼠肺脏组织中IFN-γmRNA的影响:RT-PCR结果表明，与正常对照组相比较，哮喘模型组、黄芩苷低剂量治疗组和布地奈德治疗组肺脏组织中IFN-γmRN表达量均明显降低，(P＜0.01）。说明模型建立成功成功。与哮喘模型组相比:中高剂量黄芩苷治疗组以及阳性药布地奈德治疗组哮喘小鼠肺脏组织中IFN-γmRNA表达有明显升高。(P＜0.01)。说明黄芩苷能够提高哮喘模型肺脏组织中IFN-γ的表达。
RT-PCR结果中IL-4与IFN-γmRNA的表达与血清中检测到的IL-4和IFN-γ含量的偏移趋势相一致，均显示出黄芩苷降低哮喘模型小鼠肺脏组织中IL-4的表达，提高IFN-γ的表达，说明黄芩苷能够逆转哮喘过程中发生的Th1/Th2失衡状态，从而在一定程度上达到缓解哮喘症状的作用。
结论:黄芩苷能够对豚鼠支气管平滑肌产生舒张作用，能够扩张支气管平滑肌，拮抗乙酰胆碱和组胺引起的支气管痉挛收缩，缓解哮喘症状。对哮喘模型中发生的脾脏、胸腺等免疫器官发生的免疫应答有一定的逆转作用。黄芩苷能够逆转哮喘过程中肺脏组织中的病变，降低嗜酸性粒细胞，巨噬细胞的含量，改善肺脏组织中的炎症浸润状况，从而改善哮喘的症状，并对间质性肺炎有一定的治疗作用。黄芩苷能够逆转哮喘过程中Th1/Th2的失衡状态，从而对哮喘具有一定的治疗作用。
因此，黄芩苷是一个具有良好开发前景，具有极高研究价值的重要的抗哮喘药物。