【摘 要】
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目的:
检测宫颈癌患者外周血、肿瘤组织中Th17细胞转录因子及相关细胞因子的表达水平,分析其与疾病发生发展的关系；检测宫颈癌患者外周血Th17细胞表面相关趋化因子及宫颈
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目的:
检测宫颈癌患者外周血、肿瘤组织中Th17细胞转录因子及相关细胞因子的表达水平,分析其与疾病发生发展的关系；检测宫颈癌患者外周血Th17细胞表面相关趋化因子及宫颈癌组织中对应的趋化因子配体表达水平,分析Th17细胞向肿瘤组织聚集的可能机制；观察Th17／Treg在宫颈癌患者的变化情况,探讨Th17／Treg比值改变在宫颈癌临床检测中的意义。
方法:
1.收集宫颈癌患者外周血标本及肿瘤组织标本,以健康女性外周血作为正常血标本对照、以无恶性病变行全子宫切除术患者的宫颈组织作为组织对照组。分离外周血单个核细胞(PBMC)及宫颈组织悬液中的单个核细胞,部分宫颈组织提取RNA。
2.流式细胞术和实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测外周血和肿瘤组织中Th17细胞的比例。
3.QRT-PCR测定肿瘤组织中趋化因子CXCL12、CCL20、RANTESmRNA表达水平；流式细胞术检测PBMC中Th17细胞表面相应趋化因子配体CCR5、CCR6、CXCR4的表达。
4.流式细胞技术检测外周血和肿瘤组织中Treg细胞表达水平,分析Th17／Treg细胞与疾病进程关系及对晚期宫颈癌组的Th17、Treg细胞进行相关性分析。
结果:
1.宫颈癌患者外周血中Th17细胞比例显著高于健康对照组(P<0.01),其中在健康对照和晚期宫颈癌组之间、早期和晚期宫颈癌组之间,Th17细胞比例有显著差别(P<0.01)。
2.与健康对照组相比,宫颈癌肿瘤组织中Th17细胞数量显著增加(P<0.05),在健康对照和早期宫颈癌组之间(P<0.05)、早期和晚期宫颈癌组之间(P<0.05)、健康对照和晚期宫颈癌组之间均有显著差别(P<0.01)。
3.同一宫颈癌患者,肿瘤组织中的Th17细胞比例显著高于PBMC中的比例(P<0.01)。
4.与健康对照组相比,宫颈癌患者PBMC中Th17细胞表面CCR5和CXCR4的表达无明显差异(P>0.05),CCR6显著表达(P<0.01)。肿瘤组织中CCR5、CXCR4相应配体RANTES、CXCL12表达无显著差异(P>0.05),CCR6的配体CCL20表达明显增加(P<0.05)。
5.在宫颈癌患者外周血、肿瘤组织中Treg细胞高表达(P<0.01)。
6.晚期宫颈癌组中,外周血及肿瘤组织中的Th17／Treg细胞比值均显著低于早期宫颈癌组(P<0.01),且Th17、Treg表达呈负相关(P<0.05)。
结论:
1.宫颈癌患者外周血、肿瘤组织中Th17细胞高表达,肿瘤组织中Th17细胞随着病程的进展而表达增高。
2.宫颈癌组织中存在大量的CCL20能特异地招募外周血中的CCR6+Th17细胞到达肿瘤部位。
3.宫颈癌患者外周血、肿瘤组织中Treg细胞高表达,存在Th17／Treg细胞失衡现象,这一失衡在晚期宫颈癌患者体内更明显。
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