生物反应器大规模培养Vero细胞及狂犬病毒工艺初步研究

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使用B.Braun公司Biostat生物反应器和Cytodex微载体,对Vero细胞大规模高密度培养工艺和生物反应器狂犬病毒培养工艺进行初步研究.Vero细胞能在微载体上良好贴壁生长,降低搅拌转速、减少细胞接种时培养液体积以及牛血清预处理微载体有利于细胞贴壁.使用B型生物反应器培养Vero细胞,细胞密度达到3×10<6>cells/ml.通过对C型反应器搅拌叶片的改进,能有效降低使微载体充分悬浮的搅拌转速,细胞培养密度达到2×10<6>cells/ml,接种狂犬病毒后,微载体上细胞发生明显病变,培养液使用ELISA法能检测出病毒G和N抗原,小鼠法检测病毒毒力达到6.01ogLD<,50>/ml.收获培养液经越滤浓缩、凝胶层析纯化病毒抗原,其SDS-PAGE电泳图谱与转瓶生产的狂犬病毒疫苗相同.
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