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目的: 研究贵州省某综合医院的重点科室耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus，MRSA）感染患者的非感染部位（手、鼻前庭）、环境（消毒前后）及工作人员的手（实施手卫生前后）MRSA筛查的阳性率、MRSA的分布情况及同源性，分析其传播机制及分子流行病学特点，为提高临床工作人员手卫生依从性及对环境物表的清洁消毒重视程度，验证MRSA等多重耐药菌预防与控制措施的有效性，提供实验依据。 方法: 对40例不同部位（包括血、脑脊液、尿、痰等）MRSA感染患者的非感染部位（手、鼻前庭）采集标本80份，MRSA感染患者周围环境物表、直接或间接接触这些患者的工作人员的手消毒前采集标本228份。同时患者床单元环境物表及工作人员的手进行消毒后的对比采样，采集标本228份。收集MRSA，以14种抗菌药物K-B法进行药敏试验，PCR方法检测 mecA耐药基因,随机扩增多态性 DNA(Random Amplification of Polymorphic DNA,RAPD)同源性分析，探讨MRSA感染患者携带的MRSA对工作人员的手及环境物表的污染情况，三者之间的分布特点及同源性。同时通过消毒前后对比采样及检测，验证 MRSA等多重耐药菌预防与控制措施的有效性。 结果: 1.所有标本中共分离出MRSA45株，其中从40例不同部位（包括血、脑脊液、尿、痰等）MRSA感染患者的鼻前庭采到MRSA21株（检出率52.50％），手部8株（检出率20.00%），工作人员手6株，其中医护人员4株（检出率10.52%），护工2株（检出率16.66%），MRSA感染患者床单元环境物表9株（检出率5.73%），办公环境1株（检出率6.25%）；所有消毒后（工作人员的手进行手卫生后和环境物表进行彻底清洁消毒后）采样标本，均未分离出MRSA。2.用头孢西丁药敏纸片法筛选出的MRSA菌株，均可通过PCR扩增法检测出mecA基因；3．K-B法进行的药敏试验结果显示，45株MRSA对万古霉素和利奈唑胺100％敏感，对红霉素、克林霉素、环丙沙星、庆大霉素、奎奴普丁／达福普丁、复方新诺明、利福平、四环素的耐药率分别为66.22%、55.56%、75.56%、80.00%、17.78%、17.78%、68.89%、71.11%。4．经RAPD分析45株MRSA均可分型。有3-11个条带，21株为完全相同的7条带，为A型（阳性率46.67%），18株分布在神经外科，3株分布在中心ICU；10株有完全相同的10条带，为B型（阳性率22.22%），全部分布在中心ICU。其他的较分散，为C、D、E、F、G、H、I型，每型各2个菌株（阳性率均为4.44%）。 结论: 1.本研究显示,由头孢西丁药敏纸片法筛选出的MRSA菌株,均可通过PCR扩增检测出mecA基因；2.K-B法药敏试验结果显示,MRSA除对万古霉素和利奈唑胺敏感外，对红霉素、克林霉素、环丙沙星、庆大霉素、奎奴普丁／达福普丁、复方新诺明、利福平、四环素呈多重耐药；3.RAPD分析结果显示：该院神经外科采集到的MRSA以A型为主，中心ICU以B型为主，这两个科室内流行菌株具有高度同源性;该院中心ICU及神经外科病房存在MRSA的交叉污染和医院感染暴发隐患,提示应该进一步加强医院感染管理,特别是严格手卫生及环境物表的清洁消毒；4.通过该院重点科室工作人员手卫生及环境物表消毒前后的采样对比,结果提示该院手卫生、环境清洁消毒及接触隔离措施有效。