论文部分内容阅读
第一部分、抗血管生成基因治疗大鼠C6胶质瘤的CT灌注成像与病理学对照研究
目的：通过CT灌注成像研究大鼠C6胶质瘤在重组单纯疱疹病毒介导的Angiostatin-Endostatin(Statin-AE)融合基因进行抗血管生成治疗前、后不同阶段、肿瘤不同位置的血流动力学状态，并与组织病理学相对比，探索CT灌注成像在肿瘤生长过程中及治疗后早期疗效判定中的作用。
材料与方法：雄性Wistar大鼠55只，其中50只通过脑立体定向仪于右侧尾状核接种C6胶质瘤细胞10μl(5×105细胞)，另外5只大鼠颅内注射培养液作为空白对照。在第1周MR检查确认有肿瘤生长后再将其随机匹配分为两组，肿瘤组和治疗组。检查后治疗组大鼠采用相同接种方法于颅内相同位置注入107pfu的携带Statin-AE融合基因的单纯疱疹病毒。分别于在第1、2、3周行3.0TMR检查，此外，在第2，3周还进行CT灌注成像检查，并于每周结束后各组分别处死2只、8只和余下所有大鼠进行伊文思蓝染色、HE及免疫组织化学的CD31和VEGF染色。MR成像序列包括T2WI、T1WI平扫及增强扫描，计算增强图像上的肿瘤体积。CT成像包括常规平扫、增强及灌注成像；采用Siemens16排螺旋CT的神经灌注软件包中专门的脑肿瘤灌注后处理软件重建各参数图进行测量计算。采用SPSS11.5统计软件对实验结果进行分析，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。
结果：43只大鼠尾状核见到肿瘤生长，模型成功率为86％。肿瘤组与治疗组大鼠C6胶质瘤的体积在第1、2周呈进行性增加，两组间肿瘤体积无统计学差异(P＞0.05)；第3周时两组大鼠肿瘤体积有差异(P＜0.01)。治疗组与肿瘤组大鼠C6胶质瘤rCBF和rCBV在第2周及第3周的不同区域两组间均具有统计学差异(P＜0.05)。治疗组与肿瘤组的VEGF表达率、MVD、CD31及第3周伊文思蓝染程度均具有统计学差异(P＜0.05)。肿瘤组第2周各CT参数与MVD、CD31及VEGF均有相关性；第3周rCBV与各病理学指标均有相关性，rPS与CD31及VEGF有相关性；治疗组第2、3周的rPS与VEGF正相关。第2周肿瘤组与治疗组的rPS值与伊文思蓝染色程度呈正相关(各相关r值的P＜0.05)。
结论：
1.大鼠C6脑胶质瘤模型稳定，成瘤率高，血管生成丰富，基因转染率较高，适合进行血管生成及抗血管生成基因治疗的CT灌注成像研究。
2.本研究证实CT灌注成像能有效地反映大鼠C6脑胶质瘤的微血管密度和血脑屏障破坏程度，全面地反映脑瘤的血管生成情况；可以早于肿瘤体积发生变化前发现抗血管生成基因治疗对肿瘤局部微循环状态的影响，从而在肿瘤的疗效观察和预测方面将有更大的发展空间和应用价值。
3.本实验初步证明单纯疱疹病毒介导的重组statin-AE融合基因可以通过抑制肿瘤血管生成来抑制大鼠脑内胶质瘤的生长，为胶质瘤的治疗带来了良好的应用前景。
第二部分、抗血管生成基因治疗大鼠C6胶质瘤的磁共振弥散成像与病理学对照研究
目的：以大鼠C6胶质瘤模型进行重组单纯疱疹病毒介导的Statin-AE融合基因治疗，探索常规MR检查结合DWI在胶质瘤治疗疗效观察方面的作用。
材料与方法：雄性Wistar大鼠55只，其中50只通过脑立体定向仪于右侧尾状核接种C6胶质瘤细胞10μl(5×105细胞)，另外5只大鼠颅内注射培养液作为空白对照。在第1周MR检查确认有肿瘤生长后再将其随机匹配分为两组，肿瘤组和治疗组。检查后治疗组大鼠采用相同接种方法于颅内相同位置注入107pfu的携带Statin-AE融合基因的单纯疱疹病毒。分别于在第1、2、3周行3.0TMR常规及DWI检查，并于每周结束后各组分别处死2只、8只和余下所有大鼠进行伊文思蓝及HE染色。MR成像包括增强前、后常规扫描及DWI检查；计算增强图像上的肿瘤体积，通过AW4.0工作站重建得到ADC图，并测量病灶区及对侧正常白质区ADC值。采用SPSS11.5统计软件对实验结果进行分析，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。
结果：肿瘤组与治疗组大鼠C6胶质瘤的体积在第1、2周均呈进行性增加，两组间肿瘤体积无统计学差异(P＞0.05)；第3周时两组组大鼠肿瘤体积有差异(P＜0.01)。第2周时治疗组的ADC值大于肿瘤组(P＜0.05)，但第3周时两组间比较无统计学差异(P＞0.05)。治疗组各不同时间的细胞密度值均小于肿瘤组，其差异有统计学意义(P＜0.01)。肿瘤组与治疗组不同区域的ADC值与病理学测量的细胞密度呈负相关(0.05)。
结论：
1.DWI检查可以反映大鼠C6胶质瘤细胞密度的差异，肿瘤ADC值与镜下肿瘤组织细胞构成比呈负相关，为从微观角度观察胶质瘤的生长变化及治疗反应提供了基础。
2.本研究也表明，ADC值的变化是多因素的综合作用体现，单纯对ADC的功能图像的解释可能存在偏差，必须结合常规MR图像的观察得到多层面的信息来综合分析肿瘤的变化。
3.本研究通过大鼠C6胶质瘤模型证实了ADC值在发现早期抗血管生成基因治疗反应中的有效性，为DWI应用于肿瘤的个体化治疗提供了基础。