【摘 要】
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猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征都是对养猪业造成严重危害的疾病,并产生相似的临床症状(高温、神经症状、呼吸道症状及繁殖障碍),因此导致两种病毒的鉴别诊断非常困难。此外,CSFV
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猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征都是对养猪业造成严重危害的疾病,并产生相似的临床症状(高温、神经症状、呼吸道症状及繁殖障碍),因此导致两种病毒的鉴别诊断非常困难。此外,CSFV和PRRSV的混合感染在中国也时常发生。所以,建立一种快速、高效的鉴别诊断两种病毒的方法是必须的。本研究旨在建立了一种复合荧光定量RT-PCR方法,用于CSFV与PRRSV的鉴别诊断。通过对GenBank中公布的,在CSFV 5′端非编码区设计了1对针对的通用引物和1条TaqMan水解探针,在PRRSV ORF7区设计了1对针对北美洲型PRRSV的引物和1条TaqMan水解探针,建立了一种能区分CSFV和北美洲型PRRSV的敏感、特异、重复性好的复合荧光定量RT-PCR鉴别诊断方法。该方法能将我国大陆流行的不同基因亚群(1.1、2.1、2.2和2.3基因亚群)的CSFV野毒株与不同的北美洲型PRRSV(VR-2332、HuN4和CH-1a)完全区分开来,在107-10拷贝/μL范围内,对CSFV和PRRSV标准品模板的检测具有良好的线性关系,分别可检测到初始模板中3.2个(CSFV)或1.8个(PRRSV)TCID50的病毒RNA,比常规PCR方法敏感50倍以上,二者对155份不同的现地临床样品检测,符合率均达到了99.4%。应用复合荧光定量RT-PCR对其中155份现地样品检测发现,有16份为CSFV阳性,73份为PRRSV阳性。本方法可以及早对猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征爆发做出准确快速诊断,防止疫情蔓延;可以将CSFV和PRRSV感染猪迅速从免疫猪群中筛查出来并予以清除;
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