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目的:本研究通过观察鸡血藤总黄酮(简称STF,下同)对四种血虚模型小鼠的影响,旨在探讨鸡血藤总黄酮补血作用,并初步阐述其补血作用机理。
方法:(1)按药理实验方法学对STF进行最大耐受量测定,在STF对血虚模型小鼠外周血象的影响实验中,应用PHH(盐酸苯肼)、CTX(环磷酰胺)联合法、CTX腹腔注射法、钴60放射源照射法、眼眶放血法等造成小鼠血虚模型,对小鼠外周血象进行检测和观察,并与阿胶进行比较。(2)在STF补血作用机理研究实验中,小鼠血虚模型采用PHH+CTX联合法,检测外周血象、骨髓有核细胞数(BMNC)、胸腺、脾脏指数,瑞氏染色法计数骨髓粒红比值(MER),用ELISA法评价STF对白细胞介素-3(IL-3)、促红细胞生成素(EPO)水平的影响,光镜下观察HE染色后的骨髓病理切片,以阿胶(DHG)作为阳性对照药,观察STF的补血作用机理。检测外周血象时,还增设了鸡血藤粗提物组做对照,比较STF和粗提物的补血作用。
结果:(1)用STF给小鼠灌胃给药,最大耐受量(MTD)大于5g/kg(相当于原药材125g/kg)。在STF对PHH和CTX所致小鼠血虚模型的影响试验中,各组剂量药物对血虚动物红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞比积(HCT)的下降有拮抗作用;STF对于CTX所致小鼠白细胞减少模型,各组剂量药物(除第5d小剂量组外)对小鼠WBC的下降有拮抗作用;在STF对钴60所致小鼠血虚模型的影响实验中,STF高剂量及模型组于钴60照射后7、14、21、30天,低剂量组、中剂量组于钴60照射后第7、14、21天,白细胞(WBC)明显高于照射模型组,STF各剂量组及模型组于钴60照射后7、14天,RBC明显高于照射模型组,但对钴60照射引起的血小板降低无明显拮抗作用。观察STF对失血性小鼠血虚模型的影响,各组剂量药物对失血性贫血小鼠RBC、HGB的下降有拮抗作用。(2)在补血机制研究实验中,STF各剂量组对血虚小鼠RBC、WBC、RET的下降有拮抗作用。与阳性药阿胶、鸡血藤粗提物比较无明显差异。能降低血虚小鼠粒红比值(MRT)的升高,对有核细胞(BMNC)的下降有拮抗作用。能增加血虚小鼠胸腺、脾脏指数,对IL-3的下降有拮抗作用,与模型组比较有显著性差异,但不能促进血虚小鼠EPO水平的升高。由骨髓造血组织损伤分值统计可知,模型组骨髓造血组织损伤严重,STF各剂量组骨髓造血组织恢复较好,与模型组比较差异有显著性,表明STF对于骨髓造血组织具有保护作用。
结论:(1)STF毒性小,安全系数大。(2)STF具有明显改善血虚模型小鼠外周血象,提示STF有补血的作用,并且与鸡血藤粗提物补血作用无明显差异。(3)STF补血的作用机理可能不是通过促进肾脏分泌EPO,而是改善骨髓造血结构、提高机体免疫力、促进造血调控因子IL-3的分泌以达到抗贫血作用。