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目的：建立稳定表达MTA3和luc2的胃癌细胞株SGC7901-pMTA3-IRES2-luc2；对比转染MTA3对Snail、E-cadherin表达的变化，探讨MTA3对胃腺癌EMT的影响。 方法：以pIRES2-EGFP作为模板，设计引物PCR扩增pIRES2片段，将pIRES2片段与luc2基因片段连接构建 pIRES2-luc2，将 MTA3插入到 pIRES2-luc2中构建pMTA3-IRES2-luc2共表达载体，并通过单酶切、双酶切、测序等方法对共表达载体进行鉴定；将共表达载体pMTA3-IRES2-luc2、pIRES2-luc2稳定转染至胃癌细胞系SGC7901，通过G418耐药筛选及有限稀释法筛选高表达MTA3和luc2的克隆株，并进行扩大培养建立稳定表达MTA3和luc2的细胞株SGC7901-pIRES2-luc2、SGC7901-pMTA3-IRES2-luc2。扩大培养后提取mRNA、蛋白质，利用PCR、Western blot技术，鉴定2个细胞克隆株MTA3表达的差异；利用PCR、Western blot技术检测Snail、E-cadherin表达，分析MTA3过表达对Snail、E-cadherin表达的影响。 结果：酶切、测序等结果显示pMTA3-IRES2-luc2、pIRES2-luc2共表达载体的鉴定与预期结果完全相符，共表达载体构建成功，可用于后续实验；利用 pMTA3-IRES2-luc2、pIRES2-luc2共表达载体质粒对SGC7901细胞系进行稳定转染，成功建立了稳定表达MTA3和luc2基因的细胞株SGC7901-pIRES2-luc2、SGC7901-pMTA3-IRES2-luc2；利用 PCR、Western blot等技术，鉴定2个细胞株中MTA3表达的差异，发现转染pMTA3-IRES2-luc2组MTA3表达量明显较对照组pIRES2-luc2组高，P值=0.000，有统计学意义，证明稳定转染细胞系建立成功； PCR、Western blot检测 Snail、E-cadherin表达，发现SGC7901-MTA3-IRES2-luc2细胞株Snail表达较对照明显下降，E-cadherin表达则明显上升，差别均具有统计学意义。 结论：利用共表达载体pMTA3-IRES2-luc2质粒转染胃腺癌SGC7901细胞获得MTA3过表达的细胞株。外源基因MTA3的转染可明显下调胃腺癌细胞系SGC7901 Snail的表达，上调E-cadherin的表达。