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目的:研究促酰化蛋白(ASP,Acylation Stimulating Protein)诱导前脂肪细胞分化的作用及机制.观察ASP诱导前脂肪细胞(Preadipocytes)分化过程中的形态学变化,测定分化过程中甘油三酯(Triglyceride,TG)合成及在分化细胞中的累积情况:观察分化过程中前脂肪细胞的克隆增殖;检测ASP诱导脂肪细胞过程中特异性分化转录因子过氧化物酶体增殖物活化受体γ、CCAAT/增强子结合蛋白α和CCAAT/增强子结合蛋白δ mRNA表达水平及时序性变化;并观察脂肪细胞特异性功能蛋白脂蛋白脂酶、二酰基甘油转酰酶和脂素的表达规律;分析ASP诱导分化过程中脂肪细胞基因表达谱的改变,筛选与分化相关的基因,从而探讨ASP诱导前脂肪细胞分化的分子生物学机制.以期进一步深化生命科学界对ASP这一调控脂肪代谢的新型激素的认识,从新的研究领域认识脂肪细胞分化的分子机制,并为肥胖症和胰岛素抵抗的防治开拓新思路.结论:1.新型脂源性激素ASP能够诱导3T3-L1前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化.2.ASP能够显著增加3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂肪细胞中的甘油三酯合成和积累.3.ASP能够刺激处于生长停滞期的3T3-L1前脂肪细胞重新进入细胞增殖周期,发生克隆增殖.4.ASP可以诱导3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,不同类型的分化转录因子C/EBPδ、C/EBPα和PPARγ的表达具有一定的时序性,分化早期出现的C/EBPδ表达,随后进一步诱导C/EBPα和PPARγ的表达;C/EBPα和PPARγ在分化中、晚期高水平表达,并发挥协同作用,对脂肪细胞完成终末分化具有重要意义.5.ASP诱导前脂肪细胞分化过程中,依次诱导脂肪代谢特异性功能酶脂蛋白脂酶、二酰基甘油转酰酶的表达,继而诱导脂肪细胞特异性的功能蛋白adipsin的表达.脂肪细胞功能蛋白表达的时间和强度具有严格的规律性,促使脂肪细胞生物学功能的逐步成熟.6.大量成脂相关的基因转录在时空上的有序表达,是ASP诱导前脂肪细胞分化过程中重要的分子机制.