论文部分内容阅读
目的：
针对广西HIV主要流行毒株gag、pol、env基因区建立一种早期、快速、可行的多重巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法。
方法：
1.根据广西HIV主要流行毒株gag、pol、env 3个基因的保守序列，分别设计2套巢式RT-PCR引物。
2.应用已建立的巢式RT-PCR对60份经蛋白免疫印迹试验(WB)确证的HIV阳性血样进行检测，计算检出率。
3.从gag、pol、env区分别选择一套最佳引物，用巢式RT-PCR对60份阳性样本和30份阴性样本进行检测，并将检测结果与血清学检测结果比较，计算灵敏度和特异度，然后随机选取20份阳性样本重复检测3次，对检测方法的重复性进行评价。
4.从gag、pol、env 3个基因区分别选择1套巢式RT-PCR引物，搭配组合成2组多重套巢式RT-PCR反应体系，应用降落PCR技术，在同一反应管中对以上60份HIV阳性样本和30份HIV阴性样本进行检测，检测结果与血清学检测结果比较，计算灵敏度和特异度。从60份样本中随机抽取20份，重复检测3次，计算检测方法的重复性。
5.以已知拷贝数的一系列HIV RNA模拟窗口期样本，应用已建立的多重巢式RT-PCR进行检测，并检验此方法的检测下限。
结论：
本研究所建立的核酸检测方法灵敏度和特异度高，重复性好，适用于广西HIV感染的早期检测，可缩短ELISA抗体初筛和WB确证试验的“窗口期”。