高浓度氧对炎症诱导未成熟脑白质损伤的影响

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目的:探讨常压高浓度氧(Normobaric Hyperoxia,NH)对炎症诱导未成熟脑白质损伤的影响及可能的机制。方法:将新生鼠随机分为空气对照(C)组,炎症感染(LPS)组,高氧(H)组,炎症感染+高氧(LPS+H)组。将新生3天(P3)的小鼠暴露于80%高浓度氧中48h,建立新生鼠高氧未成熟脑损伤模型;腹腔注射细菌脂多糖(0.25mg/kg)(Lipopolysaccharides,LPS)建立炎症感染模型;腹腔注射LPS且1h后80%高浓度氧暴露,建立炎症感染+高氧暴露模型。在P5天,实时荧光聚合酶连反应(Real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测小鼠脑组织中的炎症因子IL-1β(Interleukin-1β)、TNF-α(Tumor Necrosis Factor)及NF-κB(Nuclear Factor-kappa B)m RNA的表达;超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase,SOD)试剂盒化学法检测脑组织匀浆中SOD活性变化;免疫荧光法检测脑组织中NG2(Chondroitin sulphate peoteoglycan)细胞、钙离子结合蛋白(Ionized calcium binding adapter1,Iba1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cysteinyl aspartate-specific proteinase,Caspase3)以及髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)的表达;免疫印迹法(western blot,Wb)检测各组脑组织中MBP(P12)及Caspase3蛋白表达。结果:与空气对照组比较,单纯炎症或高氧暴露后,脑内炎症因子IL-1β、TNF-α及NF-κB m RNA表达均升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),但炎症感染后再给予高氧暴露,这些炎症因子表达升高更明显,SOD的活性进一步降低;与空气对照组比较,高氧或炎症暴露后,脑内Iba1表达增多,小胶质细胞开始活化;NG2和Caspase3共表达增多,MBP表达降低;而全身炎症感染后再给予常压高浓度氧暴露后,Caspase3蛋白表达进一步增加,Iba1和MBP表达均明显降低。结论:全身炎症感染可致新生鼠脑白质损伤,若此时给予常压高浓度氧暴露,可明显增加神经细胞凋亡,延迟少突胶质细胞的成熟,阻碍轴突-髓鞘化,影响脑白质的发育。这有助于我们进一步了解早产儿脑损伤发病机理和神经病理学的变化。
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