低能N<'+>诱导拟南芥突变体DNA变异的研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ly12345000
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低能离子束的诱变效应首先由中国科学家发现并将其广泛应用于育种实践,但是离子注入诱导DNA变异的研究结果主要是以微生物离体质粒DNA为材料获得的,以活体高等生物为材料的研究尚未见报道.我们以30keV N<+>(注入剂量80×10<15>ions/cm<2>注入拟南芥后获得的稳定突变体T80II为实验村料,对突变体植株进行了RAPD标记,并将T80II和对照部分RAPD特异条带进行克隆测序和DNA序列分析.结果显示,在可分辨的总计397个RAPD条带中,T80II株系中有52个条带表现出差异,包括条带的缺失和增加,条带变异率为13.1﹪;克隆的T80II序列中,平均每16.8个碱基出现一个碱基变异位点,表现出较高频率的碱基突变.碱基突变的类型包括碱基的颠换、转换、缺失、插入等.在检测到的275个碱基突变中,主要是单碱基置换(97.09),碱基缺失或者插入的比例较小(2.91﹪).在碱基置换中,转换的频率(66.55﹪)高于颠换的频率(30.55﹪).我们的研究证明通过减法杂交技术克隆低能离子诱发的突变体特异表达的cDNA是可能的,这为低能离子注入技术在分子生物学上的应用开辟了一个新思路.
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