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目的 1.建立大鼠异位全小肠移植的急性排斥反应动物模型。 2.研究血清中IL-2和TNF-α在小肠移植不同阶段的表达及其与急性排斥反应的关系。 3.分析急性排斥反应过程中选择素在蛋白及基因水平的表达变化,及其在排斥反应中的意义。 方法 选用近交系Wistar/A和F344/N大鼠建立全小肠移植模型。实验共分四组,每组18只样本:第1组非手术对照组(F344/N);第2组同基因移植组(F344/N→F344/N):第3组异基因移植组(F344/N→Wistar/A);第4组异基因移植治疗组(F344/N→Wistar/A+FK506)。每组分别于术后第3、5、7天处死,在无菌条件下采受体腔静脉血放免法测血清中IL-2及TNF-α表达;取移植肠行常规HE染色,观察组织学变化;免疫组织化学染色测组织中选择素的表达,同时检测移植肠中选择素mRNA表达的变化。术后72h内死亡者为技术失败,不包括在统计范围之内。 结果 1.异基因大鼠异位全小肠移植术后3、5、7天可出现典型的轻、中、 第四军医大学硕士学位论文重度排斥反应,而同基因组及异基因移植治疗组中未出现排斥反应。 2.异基因移植组术后3天ILZ及TNF-Q水平,显著高于其它组炉wt0,01),且随着排斥反应的加重,进一步增高。而同基因移植组及治疗组中血清几-2及TNF a的水平仅在第3、5天轻度升高,并呈下降趋势,两组间无显著差异(p>0、05)。 3.P选择素在异基因移植术后早期显著升高,但随着排斥反应的加重,持续升高不明显。而E、L选择素随着排斥反应的加重而持续升高,而同基因移植及治疗组选择素的升高不明显,且治疗组略低于同基因移植组。 结 论 通过建立大鼠小肠移植排斥反应模型的研究,结论如下: l.用放兔法测定血清中IL-二和TNF-a可作为早期检测急性排斥反应监测的较敏感的免疫指标。 2.P选择素的早期表达及E选择素和L选择素在小肠移植急性排斥反应中持续高表达对小肠移植排斥反应的早期发现有一定意义。 3.利用RTPCR测定选择素fllltry A的含量可发现小肠移植排斥反应早期局部兔疫环境的微量变化,较精确和灵敏的反映急性排斥反应的严重程度。 4选择素的表达及其介导的白细胞趋化是小肠移植急性排斥反应的启动环节,并进一步诱导急性排斥反应的发展,因此,联合测定选择素在肠粘膜中的表达对急性排斥反应的早期诊断及治疗有一定的指导意义。