论文部分内容阅读
目的：上世纪末发现的S期激酶相关蛋白(Skp2)作为F-box蛋白家族的新成员，研究发现其主要通过泛素化蛋白酶体途径降解p27kip1编码蛋白，而细胞周期依赖性激酶抑制剂p27kip1则通过阻止细胞周期蛋白(Cyclin)与细胞周期依赖性激酶(CDK)结合形成复合物，从而阻止细胞由G1期向S期转化。研究表明Skp2的高表达及p27kip1的低表达或缺失是正常细胞恶性转化及异常增殖、分化的重要因素，可能与恶性肿瘤的形成、进展及组织分化程度有关。另外国内外在前列腺癌、多发性骨髓瘤、恶性胶质瘤及喉癌的研究中发现抑癌基因PTEN的低表达或缺失大多伴随p27kip1的表达下调及Skp2的表达上调，因此推测三种基因的异常表达及相互作用在恶性肿瘤的形成、浸润、转移方面发挥重要作用。本研究主要采用免疫组织化学染色方法，检测Skp2、p27kip1、PTEN三种基因蛋白在正常大肠粘膜组织、癌旁组织、大肠癌组织中的表达情况，对三种基因编码蛋白与大肠癌各项临床病理参数的关系及三者之间在大肠癌中的相关性做出了初步研究，对三种基因蛋白在大肠癌的发生、发展方面的作用机制做出了初步探讨，讨论了三者在大肠癌诊断、治疗及预后等方面的临床意义。
方法：标本主要取自白求恩国际和平医院及河北医科大学第四附属医院2007年3月至5月的54例术后大肠癌新鲜组织标本，病理类型均为腺癌，术前均未进行放化疗处理，全部临床病理资料完整，12例癌旁组织(癌组织周围5cm以内取材)，15例正常大肠粘膜组织，经10％福尔马林溶液浸泡超过24小时，石蜡包埋制成切片后，通过免疫组化二步法检测p27kip1、Skp2、PTEN蛋白的表达情况，结合临床资料对测定数据进行统计学分析，应用SPSS10.0统计软件进行单侧Fish确切概率法、行×列表卡方检验、校正卡方检验、Spearman等级相关分析及直线相关分析等统计学方法，按α=0.05的标准，认为P<0.05有统计学意义，P<0.01有显著统计学意义。
结果：
1.Skp2在大肠正常粘膜、癌旁及大肠癌中的表达情况及与大肠癌各临床病理参数的关系Skp2蛋白在正常组织中的阳性表达率为0％(0/15)，癌旁组织中的阳性表达率为33.33％(4/12)，大肠癌组织中阳性表达率为48.15％(26/54)，统计学结果表明：大肠癌组织中Skp2的表达要明显高于正常组织，癌旁组织中Skp2的表达也高于正常组织，有统计学意义，而Skp2在癌组织与癌旁组织中的表达则无明显差别。
大肠癌组织中Skp2蛋白的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小均无相关性，与大肠癌组织分化程度(r=0.555)、外膜浸润(r=0.463)、淋巴结转移(r=0.295)、远处转移(r=0.400)呈正相关。
2.p27kip1在大肠正常粘膜、癌旁及大肠癌组中的表达情况及与大肠癌各临床病理参数的关系p27kip1蛋白在正常组织中阳性表达率为100％(15/15)，癌旁组织的阳性表达率为83.33％(10/12)，大肠癌组织中的阳性表达率为51.85％(28/54)，统计学结果表明：癌组织p27kip1的表达明显低于正常组织，也要低于癌旁组织中的表达，有统计学意义，而癌旁组织中p27kip1的表达与正常组织则无明显差别。
大肠癌中p27kip1蛋白的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、外膜浸润及远处转移均无相关性，与肿瘤组织分化程度(r=-0.481)、淋巴结转移(r=-0.369)呈负相关。
3.PTEN在大肠正常粘膜、癌旁及大肠癌中的表达情况及与大肠癌各临床病理参数的关系PTEN 蛋白在大肠正常粘膜组织中阳性表达率为93.33％(14/15)，癌旁组织的阳性表达率为75％(9/12)，大肠癌组织中的阳性表达率为62.96％(34/54)，统计结果显示大肠癌组织中PTEN表达要低于正常粘膜组织，有统计学意义，而PTEN在癌组织与癌旁组织的及癌旁组织与正常组织的表达无明显差别。
大肠癌中PTEN蛋白的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小均无相关性，而与肿瘤组织分化程度(r=-0.591)、外膜浸润(r=-0.330)、淋巴结转移(r=-0.388)、远处转移(r=-0.389)呈负相关。
4 Skp2、p27kip1、PTEN三者在大肠癌中的表达相关性应用Spearman等级相关分析等统计，结果表明Skp2蛋白与p27kip1蛋白在大肠癌中的表达呈明显负相关(rs=0.389)，Skp2与PTEN蛋白在大肠癌中的表达呈明显负相关(rs=-0.410)，而p27kip1与PTEN蛋白在大肠癌中的表达则呈明显正相关(rs=0.575)，统计学意义显著。
结论：
1.Skp2蛋白的表达可能与大肠癌的发生、发展有关，其高表达是正常细胞的恶性转化及癌细胞转移的重要先决因素。
2.p27kip1蛋白的表达影响大肠癌的发生、发展，其低表达或缺失可能促进正常细胞的恶性转化，与癌细胞的淋巴结转移有关。
3.PTEN的表达在大肠癌的形成、发展过程中发挥重要作用，其低表达或缺失可能促进正常细胞的恶性转化，增强大肠癌细胞的侵袭性。
4.随着大肠癌组织分化程度的降低，Skp2的高表达及p27kip1、PTEN的低表达或缺失的情况越明显，因此三种基因的异常表达影响大肠癌细胞的恶性分化，与肿瘤的恶性程度有关。
5.大肠癌中Skp2、p27kip1、PTEN表达的相关性研究表明大肠癌发生、发展过程实质上是癌基因与抑癌基因等相互作用、相互影响的过程。
综上所述，Skp2、p27kip1、PTEN在大肠癌形成、局部或远处转移过程中的异常表达及相关性研究，提示三种基因的相互作用可能影响正常细胞的恶性转化，直接或间接的促进大肠癌细胞的异常增殖、分化，增强其局部和远处转移的能力，对于研究大肠癌的发生、发展、转移及评价其恶性程度和预后有重要意义。