【摘 要】
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目的:探究鬼针草总黄酮体外抗氧化活性和对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善。方法:鬼针草总黄酮经由10倍体积80%乙醇回流,经大孔树脂HPD-100洗脱纯化后得到鬼针草总黄酮样品（TFB）。将TFB溶解在相应溶剂中,以抗坏血酸为对照,测定不同浓度的TFB的总抗氧化能力、对DPPH·自由基清除率、O2-·自由基清除率、·OH自由清除率。利用棕榈酸（PA）体外诱HepG2细胞,构建胰岛素抵抗（IR）细胞模
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目的:探究鬼针草总黄酮体外抗氧化活性和对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善。方法:鬼针草总黄酮经由10倍体积80%乙醇回流,经大孔树脂HPD-100洗脱纯化后得到鬼针草总黄酮样品（TFB）。将TFB溶解在相应溶剂中,以抗坏血酸为对照,测定不同浓度的TFB的总抗氧化能力、对DPPH·自由基清除率、O2-·自由基清除率、·OH自由清除率。利用棕榈酸（PA）体外诱HepG2细胞,构建胰岛素抵抗（IR）细胞模型,测定模型细胞葡萄糖的消耗量,确定棕榈酸浓度;MTT法检测TFB和PA对细胞增殖的影响;HepG2细胞采用浓度为75μmol/L棕榈酸（PA）诱导24h,建立体外IR模型,将细胞分成正常组、模型组、TFBL、TFBM、TFBH、二甲双胍阳性对照组,检测不同浓度鬼针草总黄酮对葡萄糖消耗量影响;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组胰岛素受体底物-1（IRS-1）、蛋白激酶C（PKC）和c-Jun氨基末端激酶（JNK）表达水平。结果:鬼针草总黄酮的总抗氧化能力,TFB浓度的增长,总抗氧化能力也增强,但与抗坏血酸对比能力较弱;TFB浓度为0.080 mg/m L时,对DPPH·自由基清除作用最大,最大清除率为87.32%;TFB浓度为0.040mg/m L时,其对O2-·和·OH自由基的最大清除率分别为68.75%、8.79%,半抑制浓度(IC50)分别为0.0166、0.0162和0.0072 mg/m L。IRS-1蛋白表达量,模型组相比于空白组明显减少,有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,TFBL、TFBM、TFBH以及阳性对照组的IRS-1蛋白表达量均明显增加,具有显著性差异（P<0.05,P<0.01）。PKC蛋白表达量,模型组相比于空白组增多,有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,TFBL、TFBM、TFBH以及阳性对照组中的PKC蛋白表达量均明显减少,有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。JNK蛋白表达量,模型组明显比空白组减少,有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,TFBL、TFBM、TFBH以及阳性对照组的细胞中的JNK蛋白表达量均明显增加,具有显著性差异（P<0.05,P<0.01）。结论:鬼针草总黄酮在体外具有较好抗氧化活性;对HepG2细胞IR模型有显著的改善作用,其机制可能调节IRS-JNK-PKC的表达改善IR。
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