【摘 要】
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猪瘟(Hog Cholera)是危害中国养猪业的重要疫病之一,由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起.由于CSFV病毒滴度低,不引起细胞病变,给CSFV的研究带来很大的困难.随
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猪瘟(Hog Cholera)是危害中国养猪业的重要疫病之一,由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起.由于CSFV病毒滴度低,不引起细胞病变,给CSFV的研究带来很大的困难.随着近年来分子生物学技术的发展,使人们已有可能对CSFV进行深入研究与防制,特别对于中国这样一个养猪业的大国来说,更具有十分重要的意义.该论文分为2个部分,第一部分工作主要是对CSFV结构基因E2作为基因工程疫苗的初步研究,以探讨新型猪瘟疫苗的可能性;第二部分工作侧重于CSFV C 株弱素在牛睾丸细胞中增殖的某些生物学特征并对提高病毒滴度的可能途径进行了一些探索.作者在实验中首次克隆了CSFV石门系强毒F114株结构基因E2,测定了它的核苷酸序列,并在昆虫细胞Sf9中表达出GST-E2、GFP-GST-E2融合蛋白;另外,作者还构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-E2,在COS-7细胞中得到了表达,进而作者用这一表达质粒直接在小鼠肌内注射接种,可监测出其血清呈抗E2抗体阳性反应,效价明显高于阳性对照的抗E2单抗.在探索CSFV C株的增殖特性时,作者的实验结果表明原代牛睾丸细胞中的成纤维型细胞更有利于C株弱毒疫苗的生产;一定浓度的PEG有助于提高C株的滴度,而DMSO对维持病毒的滴度也有一定的作用;另外,还发现C株可能对巨噬细胞的增殖有某种促进作用.以上这些研究工作虽然还是很初步的,但所得的结果对猪瘟新型疫苗的研制以及当前使用的CSFV弱毒疫苗的生产均提供了一些颇有启发性的实验证据.
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