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植物内生菌作为一个多样性十分丰富的微生物类群,代谢产物非常丰富,包括杀虫、抗菌、抗肿瘤等活性物质,是人们寻找新型抗菌、抗肿瘤等药物的重要资源。对实验室保藏的植物内生真菌采用固体发酵培养基进行培养,按1.5倍体积的用量用有机溶剂浸泡发酵菌丝,共保藏了近8000个发酵样品。用G+菌(枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌)、G-菌(大肠杆菌)、真菌(白色念珠菌)、耐药菌(铜绿假单胞菌、MRSA、鲍曼不动杆菌)等药物筛选模型对发酵样品进行生物活性初步筛选,结果显示,菌株的产抗率达到了45%。根据初筛结果,挑选一些抗菌活性比较高的菌株进行复筛。并从复筛菌株中挑选一株抗菌活性较高的SIPI3.0550做进一步的研究。本研究通过菌落生长状态、形态特征、菌丝和孢子形态以及其18S rDNA部分序列对菌株SIPI3.0550进行了种属关系的鉴定,经分析得知,菌株SIPI3.0550属于曲霉属,烟曲霉种。考查了不同的有机溶剂的浸泡效率,优选出丙酮作为浸泡溶剂。同时,我们还对发酵周期进行了考查,从而确定了最优的发酵周期为30天。还研究了温度、pH、光照等对菌株SIPI3.0550发酵产物monomethylsulochrin、trypacidin和C19H19O8稳定性的影响。采用生物活性检测、TLC和HPLC监测菌株代谢产物,采用静态吸附法确定了最优的两种吸附树脂NM100和微球一号,对菌体发酵产生活性成分进行分离纯化,得到了SIPI3.0550代谢产物中脂溶性活性成分的三个化合物,纯度达到99%以上(HPLC纯度)。通过理化性质鉴定和波谱分析(包括核磁共振、高分辨率质谱等),确定其中两者为monomethylsulochrin、trypacidin,另一种化合物分子式为C19H19O8,结构未能确定。测定了三种化合物的抗菌活性,结果显示trypacidin具有抗金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、藤黄八叠球菌和MRSA活性,对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和藤黄八叠球菌的MIC为16μg·mL-1,对MRSA的MIC为32μg·mL-1。本研究分离纯化采用了新材料而使方法简便高效,同时改进了固体培养的方法,使目标产物的含量有所提高。从抗菌活性检测结果可知化合物trypacidin对敏感金黄色葡萄球菌和甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的抗菌活性基本一致,显示其具有不受β-内酰胺酶影响的抗菌活性,说明化合物trypacidin具有较高的研究价值。