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目的:观察水蛭宣痹化纤汤对博来霉素所致大鼠肺纤维化模型血清中TGF-β1、LN和肺组织中Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白的影响及肺组织病理学改变,探讨水蛭宣痹化纤汤对IPF的抗炎及调节免疫的作用机理,为临床应用提供实验依据。
方法:将健康雄性SD大鼠60只随机分成5组,用3.5%水合氯醛腹腔麻醉各组大鼠,切开颈部皮肤,以血管钳钝性分离暴露气管,向气管内注射配制好的博莱霉素溶液进行造模,对照组在相同条件下气管内注射生理盐水。观察整个实验过程中各组动物的一般生活状况,连续给药21天后心脏取血测定TGF-β1、LN含量,选取大鼠左肺下叶同一部位,切片进行组织病理学检查及免疫组织化学方法检测肺组织中I型和Ⅲ型胶原蛋白表达。采用日本Olympus型光学显微镜进行扫描,并应用JD-801型号图象分析系统定量测定各组肺组织中I、Ⅲ型胶原蛋白的相对含量,分别测定平均光密度值(MOD值)。最后进行统计学分析。
结果:1.大鼠一般生活状况:正常组大鼠皮毛光滑,精神、饮食如常,体重增加;模型组与西药治疗组大鼠精神萎靡、毛枯明显、略有消瘦、呼吸急促、饮食及活动减少。中药治疗组大鼠精神较好、毛发略显干枯、无消瘦、饮食正常、较活泼。2.肺组织病理学改变:HE染色结果示模型组大鼠出现重度肺纤维化改变,中、西药治疗组出现轻中重不同程度的肺纤维化改变。3.①模型组大鼠血清中TGF-β1的含量较对照组明显升高,差异有显著性意义(P<0.05);中药组比模型组及西药组明显下降,差异有显著性意义(P<0.05)。②模型组大鼠血清中LN的含量较对照组明显升高,差异有高度显著性意义(P<0.01);中药组、西药组、模型组两两相互比较差异均有显著性意义(P<0.05)。4.大鼠肺组织中I型、Ⅲ型胶原蛋白的表达较对照组明显增加,差异有高度显著性意义(P<0.01);中药组I型胶原蛋白的表达较模型组和西药组减弱,差异有显著性意义(P<0.05);中药组Ⅲ型胶原蛋白的表达较模型组和西药组均无显著性意义(P>0.05);中药大小剂量组之间相比差异无显著意义(P>0.05)。
结论:1.水蛭宣痹化纤汤可明显改善IPF大鼠的一般状况,且能改善IPF大鼠的肺组织病理学形态。2.IPF大鼠血清中TGF-β1、LN的含量及肺组织中I、Ⅲ型胶原蛋白水平比正常组大鼠增高,提示它们参与了IPF的发病。3.水蛭宣痹化纤汤能使大鼠血清中TGF-β1、LN含量减少,抑制Ⅰ型胶原蛋白细胞外基质的合成,促使胶原纤维减少,从而起到抑制IPF发展的作用。