基于DNA构型设计的生物传感器研究

来源 :中国科学院上海应用物理研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianlanzhijian
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DNA是生命信息的载体,同时也是一种很好的纳米生物材料,其丰富而精巧的构型变化在生物传感研究中得到日益广泛的应用。本文结合纳米金胶、纳米针尖两种特殊的纳米材料,与DNA纳米尺度的构型构象变化相结合,展开生物传感方面的应用研究:   (1)DNA构型变化与酶催化放大的电化学传感策略结合,进行高灵敏基因检测。   酶放大方法应于电化学分析,可以实现便携、廉价、灵敏的检测。利用端粒酶对端粒序列扩增的活性,引入辣根过氧化物酶修饰的dUTP,利用酶催化产生电流信号,实现脱离PCR扩增的端粒酶活性检测。   类似工作基础上,引入茎环DNA杂交前后构型变化:将茎环DNA探针组装到亲和素功能化的电极表面,利用DNA探针与靶DNA杂交前后,构型发生显著变化,捕获辣根过氧化物酶,利用催化产生的电化学电流信号,实现10fM靶DNA灵敏检测。本方法被实际应用于大肠杆菌基因PCR扩增产物的检测,效果比传统方法显著提高。   (2)纳米金聚集会导致其光学性质明显改变。DNA纳米尺度构型变化,为我们研究金胶聚集体提供了完美的工具。两种金胶分别修饰有DNA探针,然后通过一条和金胶探针杂交的连接DNA,将金胶拉近形成聚集体,我们在连接DNA上添加i-motif分子马达序列,并且通过改变环境pH值,导致金胶聚集体构型发生明显变化。我们还利用pH敏感氧化铱电极、铱金属电极和非极化的银/氯化银电极构建了非传统三电极电化学芯片,利用其pH调节和稳定功能,实现对分子马达电化学自动控制。   (3)纳米针尖电极的尺寸与大多数生物分子相当,将会对生物传感应用于生命过程研究和生命物质分析提供很大帮助。我们首次在纳米电极表面组装DNA分子,利用DNA杂交前后的构型变化,对目标DNA进行无标记检测。并且利用金纳米粒子,观察到了针尖表面发生的杂交反应。
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