论文部分内容阅读
加速器质谱法(AMS)是一种超灵敏的探测14C的方法,检测水平达到1个DNA(或蛋白)加合物/1011-1012个核苷酸(或氨基酸残基),相当于可测到每毫克碳中10-18摩尔或更少的14C,能测量人在环境中的极低剂量的暴露量,评估机体的致癌性风险.该论文采用AMS,对六种饮食类物质:姜黄素、大蒜汁、葡萄籽提取物、茶多酚、维生素C和维生素E对烟草中的一种主要的生物碱——尼古丁[3-(卜methyl-2-pyrrolidinyl)-pyridine]在体内与生物大分子DNA以及血红蛋白(Hb)加合作用的阻断效应进行了研究,同时采用液体闪烁计数法(LSC),对三种多酚类物质:姜黄素、白藜芦醇和茶多酚,对体外尼古丁-DNA加合的阻断效应也进行了研究.姜黄素、大蒜汁、葡萄籽提取物、茶多酚、维生素C和维生素E均能有效的降低体内尼古丁引起的DNA/Hb的加合水平,并且除维生素C和维生素E外,其它物质的阻断效应均呈剂量相关模式.而且这些阻断剂都能抑制Ⅰ相酶细胞色素P450(CYP450)和细胞色素b5(CYb5)的活性,同时增强Ⅱ相酶谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活性(茶多酚例外).在体外NADPH和微粒体S9组分体系中,姜黄素、白藜芦醇和茶多酚能有效的抑制尼古丁引起的DNA的加合,并且阻断效应呈剂量相关模式.三种阻断剂都能抑制CYP450和CYb5的活性,同时增强GST的活性(茶多酚例外).良好的阻断效果表明这些饮食类物质可以减少体内尼古丁-DNA/Hb以及体外尼古丁-DNA加合物的形成,同时也预示它们有可能对尼古丁潜在的致癌性有一定的阻碍作用.甲酸普遍存在于人和动物体内,是一种空气和水污染物,广泛应用于人类日常生活中,对其危险性评估具有重要意义.我们采用高效液相色谱法(HPLC)与液体闪烁计数法(LSC)相结合,研究了在小鼠体内,甲酸与DNA大分子结合的动力学曲线,并且探讨了甲酸与DNA的掺入与加合的比例的变化.四氢叶酸对甲酸与DNA的体内结合有明显影响,我们对于四氢叶酸对甲酸与DNA的体内掺入与加合的比例的改变也进行了研究.实验结果发现甲酸在小鼠体内与鼠肝DNA形成结合物,其结合水平先上升,后缓慢下降,在1 d时间时达到最高值.甲酸有可能通过四氢叶酸单电子代谢途径,参与嘌呤、嘧啶的合成,从而掺入DNA的骨架合成.同时,甲酸也能直接与DNA形成加合物,而加合位点很可能是在脱氧核苷的戊糖环的5′-OH位上.代谢时间对甲酸与DNA的总体的掺入和加合的比例影响不大.四氢叶酸使得甲酸-DNA结合的放射性总计数增高,并且其增高与四氢叶酸的剂量呈现正相关性.四氢叶酸也能增大甲酸与DNA的掺入和加合的比例,但改变不是很多.我们的研究结果在分子水平上说明甲酸对DNA的损害不大,甲酸对DNA的作用主要是掺入作用,掺入的比例远大于加合,进一步的结论正在重复实验以确认.这些将为人类日常生活中甲酸的安全应用提供参考.