油桐的组织培养与再生体系研究

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油桐(Vernicia fordii Hemsley)为大戟科(Euphorbiaceae)油桐属(VerniciaL.)落叶乔木,是我国特有的经济树种。油桐种子含油率达50%-70%,其中约94%为不饱和脂肪酸,是发展生物柴油的重要原料油脂,与油茶、乌桕、核桃并称我国四大木本油料植物。在生产上,油桐主要以实生苗繁殖和嫁接繁殖为主。实生苗繁殖的种子萌发率低,种子杂合度高,对保持优良性状不利;而嫁接繁殖过程繁琐、费时费力,不能满足大规模种植需求。组织培养育苗技术繁殖速度快、繁殖系数大,可获得大量的统一规格、高质量的苗木,而且节约土地、劳力和时间。此项技术已经在部分木本植物上得到广泛应用,但在油桐等木本油料植物上的应用较少。因此,研究油桐的组培技术,开发油桐高效规模化繁育技术,对于油桐种质资源的保存、新品种的繁育和育种具有重要的意义。  本论文从外植体的类型,植物激素的种类和浓度等因素对油桐离体再生的影响,研究了油桐的直接再生体系以及通过诱导愈伤的间接再生体系。取得的主要结果如下:  1.研究了不同消毒方法对油桐种子消毒效果的影响。结果表明:最佳消毒方式为75%酒精90 s+0.1% HgCl25 min,可使污染率降低到1.11%,萌发率达到80%。  2.以油桐无菌苗叶柄、下胚轴、子叶为外植体初步建立了油桐的直接再生体系,结果如下:叶柄直接诱导不定芽的最适培养基为MS+3.0 mg/L6-BA,诱导率达88.89%,最适伸长培养基为MS+3.0 mg/L6-BA+1.0 mg/L GA3;下胚轴直接诱导不定芽的最适培养基为MS+3.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L IBA,诱导率达45.37%、平均不定芽数为3.69,不定芽增殖的最适培养基为MS+2.0 mg/L6-BA+0.05 mg/L IBA,其增殖系数可达3.13;子叶直接诱导不定芽的最佳培养基为MS+3.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L IAA,诱导率可达53.7%;油桐不定芽生根的最适培养基为1/2 MS+0.2 mg/L IBA,生根率可达97.78%;驯化后移栽到营养土∶珍珠岩∶蛭石=2∶1∶1的混合基质中,成活率达91.67%。  3.以油桐无菌苗叶片为外植体进行愈伤组织的诱导与增殖,结果表明:油桐叶片愈伤诱导和增殖的最优培养基为MS+2.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA,愈伤诱导率高达100%。在所测试的不同来源和类型的外植体中,愈伤组织的诱导率无显著差异,但愈伤组织的生长状态不同。本实验进一步优化了下胚轴愈伤诱导和增殖的最适培养基为:MS+0.05 mg/LTDZ。
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