论文部分内容阅读
背景胶质瘤是来源于神经元与胶质细胞的中枢神经系统恶性肿瘤,具有高发病率、高死亡率、高转移率的特点。尽管医疗水平不断提高,但是胶质瘤患者术后的无瘤生存时间并没有得到明显的改善。因此,目前人类急需解决的问题是寻找新的靶标来治疗胶质瘤。研究发现HOXA7高表达于多种恶性肿瘤细胞中。但是,HOXA7与胶质瘤之间的研究较少,关系尚不明确,因此,本研究旨在探讨HOXA7在胶质瘤细胞中的表达水平以及对胶质瘤细胞增殖的影响。目的本研究拟通过人胶质瘤组织检测HOXA7的表达情况,利用HOXA7 siRNA转染胶质瘤细胞后进一步阐明HOXA7对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响,以期为临床胶质瘤的诊疗提供新的靶标。方法首先,利用中国脑胶质瘤基因组图谱(Chinese Glioma Genome Atlas,CGGA)及Oncomine数据库研究HOXA7在胶质瘤中的表达情况,并进一步分析HOXA7与胶质瘤世界卫生组织(World Health Organization,WHO)等级和预后之间的关系;其次,通过Real time PCR实验检测脑胶质瘤组织与正常对照脑组织中HOXA7 mRNA水平的表达差异;然后,通过转染HOXA7 siRNA,利用Real time PCR实验检测转染后细胞中HOXA7mRNA水平的表达情况;最后,通过CCK8增殖实验检测转染HOXA7siRNA后U251细胞的增殖情况以及利用流式细胞仪检测转染HOXA7 siRNA后U251细胞的细胞周期及细胞凋亡率的变化。结果1.HOXA7在胶质瘤数据库中的表达水平以及与胶质瘤WHO等级、预后的关系首先我们通过CGGA和癌症基因芯片oncomine数据库进行数据分析,胶质瘤WHO级别越高,其HOXA7表达水平越高。HOXA7表达水平与胶质瘤分子亚型及相应药物、化疗敏感性密切相关。并且HOXA7高表达胶质瘤患者的生存期显著缩短。2.脑胶质瘤患者肿瘤组织中HOXA7的表达情况我们选取本院不同级别的人胶质瘤组织标本及正常脑组织标本作为对照,应用Real time PCR实验检测发现,高级别人脑胶质瘤组织中HOXA7表达水平明显高于低级别人脑胶质瘤组织,并且与级别高低呈正相关,随着胶质瘤恶性程度的增高,其表达水平明显升高。3.HOXA7 siRNA对U251人胶质瘤细胞增殖的影响随后,我们通过CCK8实验,发现敲低HOXA7组与空白Blank及无义序列scrambled siRNA组比较,HOXA7 siRNA组脑胶质瘤U251细胞的细胞增殖能力明显受抑制。4.转染HOXA7 siRNA后U251细胞周期与凋亡的变化通过流式细胞仪检测发现,敲低HOXA7后将细胞阻滞在G0/G1期,同时凋亡结果显示,HOXA7 siRNA组细胞凋亡率较空白Blank组及无义序列scrambled siRNA组相比明显升高。结论1.HOXA7在胶质瘤组织中高表达,并且其表达量与胶质瘤级别呈正相关,与生存期呈负相关;2.HOXA7 siRNA对U251人胶质瘤细胞的增殖具有显著抑制性;3.HOXA7 siRNA是通过将细胞周期阻滞在G0/G1期来增加细胞凋亡率,导致其对U251人胶质瘤细胞发挥抑制增殖作用。