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目的:(1)结扎大鼠双侧颈总动脉,建立脑慢性低灌实验动物模型;(2)对照研究脑缺血后不同时间大鼠阿尔茨海默病(AD)和血清一氧化氮(NO)的改变以及其二者的关系;(3)对照研究不同脑缺血时间大鼠AD和突触素的改变以及其二者的关系;(4)研究脑缺血后不同时间对大鼠行为学及脑组织结构的影响,以及探讨脑慢性低灌注与AD的关系。材料与方法:雄性四月龄Wistar大鼠36只,随机分为三组,即12周组、16周组、20周组;每组内再分为手术组6只(脑缺血组),假手术组6只(同龄对照组),以消除年龄差异。脑缺血组分离并结扎大鼠双侧颈总动脉,假手术组分离大鼠双侧颈总动脉但不结扎。各组大鼠分别于脑缺血12周、16周和20周进行Morris水迷宫实验。各组大鼠分别于脑缺血12周、16周和20周在Morris水迷宫测试实验之后,腹腔动脉采血,采用亚硝酸盐分光光度比色法检测血清NO浓度,采用放射免疫方法检测血清β-淀粉样蛋白浓度;处死动物,取大鼠脑组织,采用免疫组织化学法染色显示脑组织β-淀粉样蛋白、磷酸化Tau蛋白及突触素免疫,通过图像分析计算平均灰度值,比较各组间免疫阳性染色结果(根据图象分析系统,灰度值与染色阳性程度成反比)。结果:12周、16周和20周组Morris水迷宫试验的时间潜伏期各脑缺血组均较其同龄对照组显著延长(P<0.05),各实验组距离潜伏期较同龄对照组亦显著延长(P<0.05)。各脑缺血组采用方差分析LSD组间比较发现:脑缺血16、20周组与脑缺血12周组相比,大鼠寻找平台的时间潜伏期均显著缩短(P<0.05);而脑缺血20周组实验组大鼠寻找平台的时间潜伏期与缺血16周组实验组相比,无统计学意义(P>0.05)。距离潜伏期的统计比较与时间潜伏期比较的结果相同。Aβ和磷酸化Tau蛋白免疫组化染色结果显示:与同龄对照组相比,各脑缺血组Aβ和磷酸化Tau蛋白免疫染色在大鼠大脑皮层和海马中染色灰度值均显著降低,并且随着缺血时间的延长而逐渐降低。说明慢性脑缺血导致的脑慢性低灌注状态可以导致脑组织Aβ蛋白含量增加和Tau蛋白的过度磷酸化,进一步提示:脑慢性低灌注可以导致AD样病理变化。放射免疫检测结果显示:与同龄对照组相比,各脑缺血组大鼠血清NO水平较对照组均明显升高(P<0.05),表明慢性脑缺血可以增加血清Aβ含量。脑缺血16、20周组与脑缺血12周组相比,大脑皮层和海马中染色灰度值均显著增高(P<0.05);而脑缺血20周组与缺血16周组实验组相比,无统计学意义(P>0.05)。与同龄对照组相比,12周脑缺血组大鼠血清NO水平较对照组明显升高(P<0.05),而16周,20周脑缺血组的大鼠血清NO水平与其同龄对照组比较无显著性差异(P>0.05)。说明