钙离子对孤立肌细胞ACh自发分泌作用机理的研究

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胞吐作用是细胞选择性的把要分泌的物质或者质膜蛋白等其它物质从胞内运到胞外的过程,它是许多基本的生物活动所必需的,目前对胞吐作用的分子机制已经有了比较详细的研究和认识。在神经元和分泌细胞这些特异分化的细胞中,神经递质和荷尔蒙的分泌与胞内钙离子(Ca2+)浓度的升高密切相关。Ca2+作为细胞内最重要的第二信使之一,在胞吐作用中也起着非常重要的作用。 胞浆Ca2+主要来源于胞外和胞内。Ca2+已经被证实会影响孤立肌细胞的自发放电,但是胞外Ca2+和胞内Ca2+在其中分别起何种作用还不是很明确。 在本论文中,我们使用培养的非洲爪蟾肌肉细胞作为模型,以膜片钳为手段来研究Ca2+对于乙酰胆碱(ACh)自发分泌的作用及具体的机制。在缺乏细胞外钙的情况下,细胞质中加载了外源ACh的爪蟾肌细胞具有自发ACh量子分泌的现象,并且可以检测到脉冲式的微终板电流(MEPCs)。通过对这些电流的频率、幅度和时间进程的分析,发现在无钙和正常细胞外液中,肌细胞的分泌具有相似的分子机制。利用不同剂量的ryanodine来调节胞浆Ca2+到不同浓度。在无钙溶液中,当胞浆Ca2+浓度降低时,肌细胞的自发ACh分泌减弱,而当胞浆Ca2+浓度升高时,分泌增强。这些结果说明加载ACh的肌细胞的自发分泌以及ryanodine对这些细胞的影响都不依赖于细胞外的Ca2+。由于ryanodine受体位于肌浆网膜上,因而在这种分泌过程中,肌浆网的钙库起着重要的作用。
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