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本文主要从以下几个部分进行论述: 第一部分 血浆DNA含量及完整性在早期胃癌诊断的初步评价 目的:探讨血浆DNA ALU115、ALU247含量及完整性指数在早期胃癌诊断的初步评价。 方法:共收集28例经病理确诊的Ⅰ期、Ⅱ期胃癌术前外周血标本、18例胃良性疾病和28例正常个体外周血标本。通过定量PCR扩增短片段ALU115和长片段ALU247,检测血浆游离DNA含量及完整性指数。 结果:血浆ALU115片段含量在胃癌组为43.65(8.45-504.75) ng/μL,良性组为25.17(10.90-91.01) ng/μL,正常对照组为22.58(6.15-63.55) ng/μL,ALU115片段在早期胃癌组与良性组、正常组之间有统计学差异(P=0.002)。血浆ALU247片段含量在胃癌组为10.71(2.76-414.30)ng/μL,良性组为8.42(3.10-38.78) ng/μL,正常组为7.44(2.07-28.93) ng/μL,但三组间未见统计学差异(P=0.113)。完整性指数在胃癌组与良性组、正常组之间也未见统计学差异(P=0.776)。采用受试者工作曲线(ROC)计算ALU115片段曲线下面积为0.75(95%可信区间:0.61-0.88),其诊断敏感性78.6%,特异性64.3%,P=0.002。联合血清消化道六项肿瘤标记物ROC曲线下面积达0.86(95%可信区间:0.77-0.94),诊断敏感性91.7%,特异性67.4%, P<0.001。 结论:血浆ALU115片段含量在早期胃癌的筛查具有潜在临床应用价值,结合现有肿瘤标志物可提高其筛查效能。 第二部分 胃癌常见血浆游离microRNAs与诊断及组织学特征的初步研究 目的:探讨胃癌常见血浆microRNAs含量与胃癌临床病理之间的关系及与正常人群的差异。 方法:收集胃癌患者术前外周血标本48例和正常对照外周血标本22例,预先加入外源性提取参照cel-miR-39,经提取及转录合格的标本经实时定量PCR方法检测血浆miR-16、miR-17-5p、miR-18a、miR-20a、miR-21、miR-22、miR-106a、miR-125b、miR-200c、miR-221表达含量。 结果:1、血浆miR-22、miR-125b、miR-106a、miR-200c、miR-221在正常组及早期胃癌中检出率低于50%;2、血浆miR-21/miR-16比值在正常组、早期胃癌组及进展期胃癌组有明显的统计学差异(P=0.001);血浆miR-17-5p/ miR-20a比值和血浆miR-17-5p/miR-21在正常对照组、早期胃癌组、进展期胃癌组分布均存在差异(P=0.002、P≤0.001);血浆miR-17-5p/ miR-21比值作ROC曲线下面积达0.82(95%可信区间0.70-0.94);3、血浆miR-17-5p/miR-16比值与肿瘤神经侵犯有关(P=0.027),血浆miR-17-5p/miR-16比值与肿瘤脉管侵犯有关(P=0.037)。 结论:胃癌患者术前血浆游离miR-17-5p/miR-21比值具有胃癌潜在诊断价值,miR-17-5p/miR-16比值能够提示胃癌组织生物学特点。 第三部分 进展期胃癌血浆microRNAs表达水平与预后及治疗的关系 目的:探讨血浆microRNAs表达水平与进展期胃癌预后及治疗的关系。 方法:回顾性分析2010年3月至2012年8月在南京鼓楼医院肿瘤中心治疗的进展期胃癌患者49例,收集血浆标本,通过实时荧光定量PCR方法,以miR-16为内参,检测血浆miRNA表达水平、收集临床资料和生存资料,使用SPSS软件统计分析,采用Kaplan-Meier法计算生存率,分析临床病理资料和生存时间与血浆miRNA表达水平的关系。采用卡方检验分析血浆miRNA表达水平与患者临床病情评价的关系。 结果:1、血浆miR-200c表达水平与Ⅳ期胃癌患者总生存期有关(P=0.029),血浆miR-200c低表达的胃癌患者(中位总生存期15月)总生存期长于高表达者(中位总生存期12月)。血浆miR-18a表达水平与进展期胃癌患者总生存期有一定趋势但未见统计学差异(P=0.098);2、进展期胃癌患者年龄、性别、肿瘤分化程度和手术方式与血浆miRNA表达水平均未见到统计学差异;肿瘤原发部位与患者总生存期有关(P=0.013)。累及近端胃的患者(中位生存期21月)预后较累及远端胃的患者(中位生存期17月)和全胃病变的患者(中位生存期10月)预后较好;3、病情进展的胃癌患者血浆游离miR-200c的表达水平多升高(P=0.046)。 结论:血浆游离miR-200c与Ⅳ期胃癌患者总生存期有关,病情进展的胃癌血浆游离miR-200c表达水平有升高趋势。