【摘 要】
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目的: 本研究运用改良线栓法制备大脑中动脉阻塞(Middle cerebral arteryocclusion, MCAO)模型,立在建立成功率高、稳定性强、可重复操作且脑血管特征与人类高度相似的大鼠
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目的: 本研究运用改良线栓法制备大脑中动脉阻塞(Middle cerebral arteryocclusion, MCAO)模型,立在建立成功率高、稳定性强、可重复操作且脑血管特征与人类高度相似的大鼠脑缺血模型,利用高分辨磁共振波谱(H-R1H-MRS)连续检测MCAO大鼠脑梗塞后1h、3h、9h及24h不同时间点梗死侧与对侧大脑代谢物的改变,评价HR1H-MRS在MCAO后不同时间点脑损害区域与梗塞远隔部位中的应用价值,为应用波谱分析生化物质角度评价神经机能联系不能学说提供实验基础和理论依据。 方法: 将37只健康成年雄性SD大鼠随机分成2组:A组(MCAO组)28只,参照改进的线栓法建立MCAO大鼠模型,B组(假手术对照组)9只,线栓仅插入颈内动脉深度小于1.5cm,未到达大脑中动脉的起始处。MCAO模型成功后依照1h、3h、9h及24h(每组7只)各时间点每组随机抽取2只使用Philips Achieva3.0 T超导高场磁共振扫描仪,行冠状面T1加权成像(T1-weighted imaging,T1WI)、T2加权成像(T2-weighted imaging,T2WI)和DWI序列成像检查,并按各时间点将大鼠模型断头取脑、制备样品在Bruker AvANCEⅢ600 NMR谱仪上进行高分辨波谱分析。 结果: 1.假手术组左右侧大脑各代谢物浓度无显著差异。 2.本研究中MCAO缺血1h、3h、9h及24h模型组和假手术组在第一主成分上均能够明显区分,表明这两组比较存在较大差异;不同时间点缺血模型组四组之间能在第一主成分上很好地相互区分开,而且随着缺血时间的加长,不同时间点的缺血模型组代谢轮廓与缺血1h模型组的差异越来越大,同时并没有出现一个回归趋势。 3.模型组左侧大脑与假手术组对照,不同时间点Lac呈持续性增长,Ala、 GABA、Gly的浓度均升高,与对照组有显著差别(p<0.05);Glu、NAA、Cre和Asp的浓度则显著降低(p<0.05),NAA、Cr、Asp的浓度于3h后下降明显(p<0.05)。Cho的浓度则于1h、3h及24h后著升高,9h时略有回落(p<0.05)。 4.模型组与假手术组右侧大脑代谢物相比,MCAO大鼠梗死对侧大脑Lac、Asp都是升高的、与假手术组有统计学差异,Cho的浓度在24h较假手术组升高,Ala相对升高、Cr相对有所下降,但是没有明显的特征性。 5.MCAO组双侧大脑代谢物含量比较,右侧大脑Lac、GABA、Gly、 Ala、Cho浓度低于左侧,Lac、GABA、Gly浓度随左侧升高而升高, Ala、 Cho浓度随左侧升高而降低;NAA、Asp、 Cre、Glu浓度右侧高于左侧,NAA、Asp、 Cre浓度随左侧降低而降低,Glu浓度随左侧降低而升高。 结论: 1.改良线栓法可成功建立一侧大脑中动脉供血区脑梗塞大鼠模型,MCAO模型操作简单、稳定可靠,是模拟人脑梗塞有效量化的理想模型。 2.HR1H-MRS能从分子水平反映MCAO大鼠脑损伤及其代谢学变化特征,对脑梗塞物质能量代谢和病理生理学研究提供了客观依据。 3.与假手术对照组大鼠右侧大脑相比,MCAO后梗死对侧鼠脑的部分代谢物含量值有统计学差异,说明脑损害对侧远隔部位可能存在神经机能联系不能现象。 4.MCAO后鼠脑远隔部位代谢物浓度值随梗死区域变化而变化,间接证明神经传导通路可能在神经机能联系不能现象的发生中起紧密作用,也可能与脑缺血损伤部位的神经递质的代谢紊乱密切相关。
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