论文部分内容阅读
毒死蜱是高毒有机磷农药的替代品种,被广泛应用于农业生产和生活中,随着对毒死蜱毒理学研究的深入,毒死蜱对环境、人类以及动物的危害逐渐被人们认识。微生物降解是毒死蜱环境污染去除的有效方法之一,已经越来越受到人们的重视,关于毒死蜱微生物降解的研究也不断深入。本研究以农药毒死蜱作为主要的对象,以本实验室筛选的毒死蜱降解菌Rhodococcus rhodochrous（D3）为出发菌株,研究D3菌对毒死蜱等有机磷农药在水中的微生物降解,毒死蜱降解菌D3的固定化方法和制备以及固定化微生物的特性,D3降解菌的降解酶提取和降解酶的特性。主要内容如下:1.降解谱试验研究得出:D3降解菌对对硫磷、甲基对硫磷、马拉硫磷和杀螟硫磷的24 h降解率分别为99%、98%、88.7%、76.9%,在加菌浓度为107 CFU·mL-1条件下,降解半衰期分别为:3.830 h、3.501 h、5.004 h、10.830 h。2.研究了降解微生物的固定化方法。选取湿菌体量、固定剂CaCl2浓度、包埋剂海藻酸钠浓度和固定化时间为正交因素设计正交实验,以固定化微生物对毒死蜱的降解率为考察指标,研究表明,固定化微生物的最佳固定化条件为:湿菌体量3.0 g、CaCl2浓度4%、海藻酸钠浓度2%、钙化时间8h。3.研究了固定化微生物对毒死蜱的降解特性。结果表明,固定化微生物对毒死蜱的最佳降解温度为30℃,最佳pH为7.0,对毒死蜱有稳定的吸附,无再次释放,机械强度与传质性能较好。4.初步研究了降解酶的提取分离条件,进行毒死蜱降解菌降解酶的定位与诱导性实验,研究得出,降解酶主要是胞内组成酶。5.以牛血清白蛋白为标准蛋白,测得毒死蜱降解细菌D3胞内粗提酶中可溶性蛋白质含量为1.295mg·mL-1;该酶的米氏常数Km为0.7899mmol·L-1,最大反应速率Vmax为0.14415μmol·min-1;在pH为6.5、温度25℃的时候,降解酶对毒死蜱有最好的降解效果,保存在pH7.0、温度10℃条件下,毒死蜱降解酶有最好的稳定性。