海洋鱼类病原菌鳗弧菌毒力质粒pEIB1的全序列测定及复制区的定位

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弧菌病是世界水产养殖业的最大危害性疾病之一,而鳗弧菌是海水鱼类弧菌病的最主要病原菌。   前期研究从山东黄海海域高密度养殖鲈鱼(Lateolabraxjaponicus)爆发的弧菌病病原体内分离得到了鳗弧菌V.anguillarumMVM425,初步分析其内含pJM1类似的毒力大质粒pEIB1。本工作采用亚克隆法与引物步移法相结合的测序策略,对pEIB1进行了全序列测定。   鳗弧菌的研究中主要集中在毒力机制研究方面,对其利用转化的遗传操作研究报道较少,迄今也未有高效的转化方法。我们采用电转化的方法,对鳗弧菌的转化系统进行了优化,用272mmol/L蔗糖洗涤缓冲液制备的电转细胞,在2.0kv,3ms的脉冲条件下,pUC18(2.7kb)的转化率达~106个转化子/μg,这为鳗弧菌中的常规遗传操作提供了良好的基础。
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