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目的:通过体外研究初步探索纳米银(nanosilver,Nano-Ag)水凝胶涂膜对气管导管(Endotracheal tube, ETT)表面铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)生物膜形成的干预作用。方法:实验共设6组分别为空白对照组、表面涂Nano-Ag 3.5、7.0、10.5、14.0、17.5μg/cm~2组。以ETT为载体参考Brown平板培养法制备铜绿假单胞菌生物膜(Pseudomonas aeruginosa Biofilm,PA-BF)模型,在生物膜(Biofilm,BF)形成6h、12h、18h、24h时,(1)通过超声震荡-平板菌落计数法检测单位表面积ETT上活菌数量。(2)通过荧光素双乙酸盐/碘化丙啶(FDA/PI)进行活/死菌双染色,借助激光共聚焦显微镜(Laser confocal scanning microscopy ,CLSM)观察BF形成不同时间点ETT表面活/死菌分布情况。(3)利用电子扫描显微镜(Scanning electronic microscopy,SEM)观察BF形成不同时间点3.5μg/cm~2涂膜组及24h所有实验组ETT表面BF形态变化。结果:(1)体外培养6h时,各涂膜组ETT表面活菌数量显著少于空白对照组(P<0.05),且活菌数量随单位表面积上Nano-Ag剂量增加而减少(P<0.05)。体外培养12h时10.5、14.0及17.5μg/cm~2涂膜组ETT表面活菌数量显著少于空白对照组(P<0.05),活菌数量随Nano-Ag剂量增加而减少(P<0.05)。3.5、7.0μg/cm~2涂膜组及空白对照组表面活菌数量未见明显差异(P>0.05);体外培养18h时,仅17.5μg/cm~2涂膜组表面活菌数量少于空白对照组(P<0.05),其余各组活菌数量未见差异(P>0.05)。体外培养24h时,6个实验组ETT表面活菌数量均未见显著差异(P>0.05)。(2) CLSM观察可见:体外培养6h、12h时,各涂膜组ETT表面出现不可逆性细菌粘附,无规则散点样分布,未见典型BF结构形成。体外培养18h时,空白对照组ETT表面已有典型片状BF结构形成,活死菌数量相近。3.5、7.0、10.5ug/cm~2涂膜组ETT表面可见BF雏形,分布稀疏尚未形成大片状,细菌数量与Nano-Ag剂量相关,14、17.5 ug/cm~2涂膜组ETT表面仅有较大的细菌菌落形成,周围出现细菌聚集现象,未见明显BF结构形成。体外培养24h时,17.5ug/cm~2涂膜组表面可见稀疏分布的BF结构,活菌多于死菌。其余各实验组ETT表面已有大量细菌堆积粘连,在整个ETT表面形成一层凹凸不平的膜状物,各实验组之间未见明显形态差异。(3)SEM观察可见:体外培养18h时,空白对照组ETT表面有大量细菌粘连堆积,形成一层凹凸不平的BF结构,几乎覆盖于整个ETT表面。3.5ug/cm~2涂膜组ETT表面可见蘑菇状、丘陵状厚度不均的BF结构形成,而细菌数量明显少于空白对照组。体外培养24h时,3.5ug/cm~2涂膜组ETT表面可见典型BF形态,7.0、10.5ug/cm~2涂膜组ETT表面可见分散的BF结构。14.0、17.5ug/cm~2涂膜组ETT表面细菌较少,粘连堆积成团,可见数量不等的无结构均质样团块突起于ETT表面,未见明显BF结构。结论:纳米银水凝胶涂膜可有效减少ETT表面PA粘附数量,延缓ETT表面PA-BF形成,其作用强度随培养时间延长而减弱,随单位表面积上Nano-Ag剂量增加而增强。