【摘 要】
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斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)为海水名贵鱼类,但由于其存在生长较慢,养殖周期较长,饵料转换率较低,性成熟较迟,生育能力低,仔鱼的存活率低等问题,造成供养殖的种苗严重
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斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)为海水名贵鱼类,但由于其存在生长较慢,养殖周期较长,饵料转换率较低,性成熟较迟,生育能力低,仔鱼的存活率低等问题,造成供养殖的种苗严重缺乏,限制了斜带石斑鱼产业化的发展.该论文对斜带石斑鱼PACAP基因进行研究,以期通过基因重组技术生产出新型生长与繁殖调节剂,解决斜带石斑鱼生产中存在的问题.该课题通过利用生理学、生物化学、内分泌学、生物信息学和分子生物学的研究方法,进行了基因的克隆、体外重组表达、基因重组产品的纯化和生理活性检测等研究,力图阐明鱼类PACAP及其类似物刺激鱼类脑垂体GH释放的结构与功能关系.在此基础上,利用半定量TR-PCR方法对斜带石斑鱼胚胎及仔鲁期的GHRH/PACAP前体mRNA的表达情况进行了检测.利用该方法对脑组织和外周的22个部位GHRH/PACAP前体的mRNA的分布进行检测.该文利用基因工程手段,将PACAP基因进行改造并进行原核表达,然后分离重组蛋白,研究重组融合蛋白PACAP的生理活性.该研究中构建了PACAP基因的融合表达质粒pTRX-PACAP,然后对其表达条件进行了筛选.利用斜带石斑鱼下丘脑碎片和脑重体碎片离体静态孵育的方法,对此重组融合蛋白的生理活性进行了检测.
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