论文部分内容阅读
目的：探讨CD8+CD122+T细胞是否参与了脑缺血的病理过程，及其在这个过程中对脑内星形胶质细胞的作用。方法：健康雄性C57BL/6小鼠，随机平均分成永久性MCAO(Middle Cerebral Artery Occlusion)1d.3d、5d.7d和假手术组(n=4～6，相应时间点取小鼠脑组织做冰冻切片，免疫荧光染色检测小鼠缺血侧脑组织中CD8+CD122+T细胞的浸润情况；预定时间点取小鼠胸腺、脾、脑组织中淋巴细胞流式细胞术检测CD8+CD122+T双阳性细胞比例的变化情况：取新生C57BL/6小鼠星形胶质细胞进行原代培养，建立OGD(Oxygen and GlucoseDeprivation，OGD)模型，与淋巴细胞共培养，星形胶质细胞提取RNA，RT-PCR方法检测星形胶质细胞中IL-1β，TNF-α，IFN-γmRNA的相对表达量变化。结果：1.流式细胞术检测模型鼠脾及胸腺CD8+CD122+T细胞呈现先增高后降低的趋势；2.各时间点小鼠缺血脑组织均存在CD8+CD122+T细胞浸润，且随脑缺血时间延长，缺血侧脑组织双阳性细胞浸润数量逐渐增加，在5d和7d时统计学差异显著，与假手术组相比，P5d<0.05，P7d<10.05:3.氧糖剥夺(Oxygen-glucose-deprivation，OGD)培养之后，HBSS组较对照组(Control)正常培养星形胶质细胞IFN-γmRNA表达明显增高，p<0.01；CD122-blocked组较CD8+组IFN-γmRNA表达明显增高，p<0.05；CD8+组较HBSS组IFN-γ mRNA表达降低，p<0.05。HBSS组较对照组星形胶质细胞TNF-αmRNA表达明显增高，p<0.001；CD122-blocked组较CD8+组TNF-αmRNA表达明显增高，p<0.050 HBSS组较对照组星形胶质细胞IL-1βmRNA表达明显增高，p<0.01；CD122-blocked组较CD8+组IL-1β mRNA表达明显增高，p<0.01；且CD8+组较HBSS组IL-1βmRNA表达有降低的趋势。结论：1.CD8+CD122+T细胞参与脑缺血病理过程；2.随着缺血时间的延长CD8+CD122+T细胞在缺血脑组织中呈现先逐渐增高的变化趋势；3.随着缺血时间的延长CD8+CD122+T细胞在胸腺及脾中呈现先增长后降低的变化趋势：4.CD8+CD122+T细胞通过抑制星形胶质细胞IFN-γ，TNF-α，IL-1βmRNA的表达在脑缺血过程中发挥保护作用。