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目的:
1.在体内实验,研究化瘀导致汤是否可以有效防治庆大霉素所致的急性肾损伤及后期的纤维化,并探讨机制;
2.在体外实验,研究化瘀导滞汤有效成分SA-B是否可逆转肾间质纤维化,希望为终末期肾病提供一种新的治疗方法。
方法:采用常规生化和HE染色方法观察化瘀导滞汤对庆大霉素所致肾急性损伤和肾间质纤维化大鼠的肾功能,肾组织形态的改善;采用Western blot方法观察化瘀导滞汤对庆大霉素所致肾急性损伤NF-KB和后期肾间质纤维化组织a-SMA、Smad2、Smad7的表达影响;并在体外培养人源性肾小管上皮细胞株HK-2细胞,用转分化生长因子β1(TGF-β1)刺激造成细胞损伤,采用Western-blot等方法检测丹参酚酸B盐和骨形成蛋白-7对HK-2细胞E-钙粘蛋白、a-SMA表达的影响。
结果:
1.用庆大霉素制作肾间质纤维化模型成功;
2.化瘀导滞汤对庆大霉素所致肾脏急性损伤有良好的防治作用;
3.化瘀导致汤可以防止庆大霉素损伤肾脏进展到纤维化;
4.骨形成蛋白-7对TGF-β1刺激造成的小管上皮-间充质转分化(EMT)过程有一定逆转作用。
5.在本实验,未发现丹参酚酸B盐对小管上皮.间充质转分化(EMT)过程有逆转作用。
结论:化瘀导滞汤有良好的抗庆大霉素所致肾组织脂质过氧化损伤作用和改善肾功能作用,从而制止肾间质纤维化的发生,体现了中医治未病的思想;骨形成蛋白-7可以重新诱导小管上皮-间充质转分化后E-钙粘蛋白的表达,丹参酚酸B盐未发现有此作用,骨形成蛋白-7和丹参酚酸B盐对小管上皮.间充质转分化后增高的a-SMA无明显影响。