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目的:
通过检测补肾活血的中药复方益妇宁软胶囊对去势雌性大鼠及免疫低下小鼠的免疫功能的影响,探讨该方药在免疫调节方面的作用。通过检测生殖内分泌激素含量、脾脏雌激素受体表达以研究其发挥免疫调节作用的机理,为其改善更年期综合症状提供实验依据。
方法:
1.将成年SD雌性大鼠去势后复制成CS模型,给药12周后,采用放射免疫法测定大鼠血清性激素(E2、FSH、LH、Te、P)和白介素-2含量,用流式细胞仪测定血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+亚群。同时取胸腺、脾脏,称重,计算脏器指数。脾脏分别用中性福尔马林、多聚甲醛固定后用于免疫组化、免疫荧光,部分液氮保存用于Westernblotting检测。
2.取18-22g昆明小鼠,雌雄各半,皮下注射环磷酰胺制作免疫功能低下模型,连续给药7天后,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞转化率,采用免疫溶血素法测定血清溶血素含量及小鼠胸腺、脾脏指数,用小鼠碳粒廓清实验测定单核巨噬细胞的吞噬活性。
结果:
1.YFN能升高去势大鼠血清E2水平(P<0.05或P<0.01),能增加去势大鼠FSH和P含量(P<0.05和P<0.01),提高胸腺、脾脏指数(P<0.05或P<0.01),增加血中CD3+、CD4+百分含量(P<0.05或P<0.01),CD8+变化不明显(P>0.05),升高CD4+/CD8+比值(P<0.05或P<0.01),并能明显增加去势大鼠血清IL-2含量(P<0.05或P<0.01)。用免疫组化和Westernblotting法检测脾脏ER表达水平,均有显著升高(P<0.05),免疫荧光检测发现阳性细胞数明显增加。
2.益妇宁软胶囊可以增强免疫抑制小鼠的T淋巴细胞转化率(P<0.05或P<0.0D,与模型组比较,各用药组小鼠的吞噬指数、廓清指数明显增大(P<0.05),血清溶血素含量显著增加(P<0.01),小鼠胸腺、脾脏脏器指数显著提高(P<0.05或P<0.01)。
结论:
YFN可提高去势大鼠血清性激素水平,增强脾脏ER表达,从体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫三方面整体调节机体免疫力,多层次、多途径、多环节调节机体神经内分泌免疫网络,从而达到稳定内环境,缓解CS症状的目的。其发挥免疫调节作用的途径不仅仅是通过雌激素-雌激素受体效应,而且通过多靶点、多环节发挥综合疗效。