【摘 要】
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目的：建立体外大鼠脑弥漫性轴索损伤模型,测定损伤前后不同时间乳酸脱氢酶(LDH)的水平,观察米诺环素(盐酸二甲胺四环素)的神经保护作用。 方法：原代培养新生Wister大鼠脑皮
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目的：建立体外大鼠脑弥漫性轴索损伤模型,测定损伤前后不同时间乳酸脱氢酶(LDH)的水平,观察米诺环素(盐酸二甲胺四环素)的神经保护作用。
方法：原代培养新生Wister大鼠脑皮质神经细胞,培养种植于六孔板。采用划伤、加压合并离心损伤模型。通过测定神经细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)在损伤前后不同时间段,损伤组、对照组和损伤加米诺环素组神经细胞培养液中的含量变化,来观察机械性的碾挫等外力作用对神经细胞的损伤作用以及米诺还素的神经保护作用。用MAP-2免疫荧光化学鉴定神经元,MAP-2为神经元胞体和树突的特异性标志物；GFAP免疫荧光化学鉴定星型胶质细胞；CD-68单克隆抗体鉴定小胶质细胞,观察不同神经细胞损伤前后的形态学变化。
结果：损伤组与对照组神经细胞培养液中LDH值比较,差异具有显著性,损伤组LDH的含量曲线呈双峰形,第一峰值在30分钟出现,第二峰值在72小时出现。损伤组、对照组与加入米诺环素组在24小时,48小时,72小时LDH的含量有显著性差异。
结论：瞬间加速度离心损伤模型损伤前后各时间点LDH活力损伤组与对照组比较,表明本实验应用的损伤模型确实使细胞损伤,为体外大鼠脑弥漫性轴索损伤可靠模型；本实验表明米诺环素具有神经元保护作用。
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