【摘 要】
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甲硫氨酰氨肽酶是一类负责剪切新生蛋白N端甲硫氨酸的蛋白酶,对于蛋白的翻译后修饰和维持细胞正常生理功能具有非常重要作用.人源Ⅱ型甲硫氨酰氨肽酶已被证明是抗肿瘤血管生
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甲硫氨酰氨肽酶是一类负责剪切新生蛋白N端甲硫氨酸的蛋白酶,对于蛋白的翻译后修饰和维持细胞正常生理功能具有非常重要作用.人源Ⅱ型甲硫氨酰氨肽酶已被证明是抗肿瘤血管生成化合物TNP-470体内的作用靶点,因此人源Ⅱ型甲硫氨酰氨肽酶被认为可能是一个新的抗肿瘤靶点.然而,Ⅰ型甲硫氨酰氨肽酶在体内与哪些生理功能有关还未有报道.我们利用原核表达的人源Ⅰ型甲硫氨酰氨肽酶进行高通量筛选,获得抑制此酶的关键结构.根据构效关系,以活性指导设计的原则,改造合成出一类HsMetAP Ⅰ选择性抑制剂.此类抑制剂能有效降低肿瘤细胞增殖速度,并且将细胞阻滞在S期.为进一步研究HsMetAP Ⅰ抑制剂在细胞内的作用靶点,我们设计并合成了针对HsMetAP Ⅰ的特异dsRNA,尝试利用RNA干扰技术特异性的降低HsMetAP Ⅰ在细胞中的表达水平,发现HsMetAP Ⅰ siRNA与其抑制剂一样可有效遏止肿瘤细胞的生长,并同样将细胞阻滞在S期;而且在HeLa细胞内HsMetAP Ⅰ表达的下调能够诱导凋亡.以上实验结果说明HsMetAP Ⅰ对于肿瘤细胞的生长是必不可少的,提示HsMetAP Ⅰ是治疗肿瘤的一个潜在靶点.
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