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免疫系统是机体的重要防御系统，通过识别自我和异己产生免疫应答，发挥防御、监视和免疫自稳功能。T细胞足淋巴细胞的主要组成部分，是免疫系统中重要的免疫效应细胞，介导机体的特异性免疫应答。T细胞功能活性的发挥受局部组织微环境的影响，包括氧浓度和细胞因子的分泌等。对荷瘤动物模型的体内研究和实体瘤患者的临床检测表明，在肿瘤局部免疫应答低下，免疫细胞功能受到严重抑制。而肿瘤局部微环境的一个显著特征是存在一种极度低氧状态，它能影响免疫应答的类型和效果，参与炎症及肿瘤等具有局部低氧微环境特征性病理过程的发生与转归，但有关低氧对T细胞功能表型改变及机制的报道甚少。近年来的研究发现T淋巴细胞表面重要功能受体CCR7的表达与其生存密切相关，已证实肿瘤患者T淋巴细胞凋亡加速，与其细胞表面CCR7表达下调有关，但机制目前尚不清楚。我们从低氧引发的信号通路对T细胞生存活性和功能受体CCR7表达的影响方面对肿瘤微环境中免疫应答低下的原因和机制进行了验证和探讨，这对理解固有和过继性免疫以及开展新的和更具有选择性的抗炎和抗肿瘤治疗都具有重要的意义。
1.目的
体外模拟肿瘤低氧微环境，检测低氧对T淋巴细胞生存活性的影响及其机制，揭示肿瘤微环境中免疫耐受和免疫逃逸机制的分子基础，为肿瘤疫苗的研发以及其他基于免疫的癌症治疗方案提供理论依据。
2.方法
2.1人外周血单个核细胞中T淋巴细胞的分离与培养；
2.2流式细胞术检测T淋巴细胞上CCR7的表达；
2.3流式细胞术检测T淋巴细胞的凋亡率；
2.4RT-PCR检测T淋巴细胞上腺苷受体的表达；
2.5激动和阻断T淋巴细胞上的腺苷受体，流式细胞术检测CCR7的表达和细胞的凋亡率。
3.结果
3.1低氧(1％O2)、LPS均不影响人外周血T淋巴细胞的生物学形态；
3.2低氧抑制T淋巴细胞上CCR7的表达(P＜0.05)，而LPS对CCR7的表达没有影响；
3.3低氧上调T淋巴细胞的凋亡率(P＜0.05)，而LPS对细胞的生存活性没有影响；
3.4在常氧(21％O2)和低氧(1％O2)环境下，四种腺苷受体在T淋巴细胞上均有表达，其中低氧环境下表达下调的基因是A1R(P＜0.05)，表达上调的基因是A2aR和A2bR(P＜0.05)，A3R的表达没有显著变化；
3.5常氧环境下激动总体腺苷受体和单一激动A2aR均能抑制T淋巴细胞上CCR7的表达和细胞的生存活性(P＜0.05)，而A1R和A3R的作用不明显；
3.6低氧环境下阻断A2aR或A2bR均能上调T淋巴细胞上CCR7的表达和细胞的生存活性(P＜0.05)。
4.结论
4.1低氧微环境促进T细胞凋亡，其机制可能与其CCR7表达的下调有关；
4.2T细胞上四种腺苷受体在常氧和低氧条件下都有表达；低氧下T细胞上A2aR和A2bR表达上调，A1R表达下调，A3R的表达没有显著改变；
4.3低氧条件下CCR7表达降低引发的细胞生存活性的降低与A2aR和A2bR信号通路有关。
综上所述，肿瘤低氧微环境中大量积聚的胞外腺苷通过腺苷受体A2aR和A2bR下调T细胞上CCR7的表达，从而抑制T细胞的生存活性并影响T细胞到肿瘤位点的浸润。这一作用在一定程度上抑制了抗肿瘤T细胞效应功能的发挥，从而对免疫应答产生负调控的作用。